BAA

ОБ УТВЕРЖДЕНИИ ИНСТРУКЦИИ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ЭКСПЕРТИЗЕ
РАСТИТЕЛЬНЫХ ПОДКАРАНТИННЫХ МАТЕРИАЛОВ
В ПРИДНЕСТРОВСКОЙ МОЛДАВСКОЙ РЕСПУБЛИКЕ

ПРИКАЗ

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ
ПРИДНЕСТРОВСКОЙ МОЛДАВСКОЙ РЕСПУБЛИКИ

13 декабря 2007 г.
N 727

(САЗ 08-9)

Зарегистрирован Министерством юстиции
Приднестровской Молдавской Республики 7 марта 2008 г.
Регистрационный N 4345

В соответствии с Законом Приднестровской Молдавской Республики от 11 марта 2004 года N 395-3-III "О фитосанитарном карантине" (САЗ 04-11), с изменениями и дополнениями, внесенными Законом Приднестровской Молдавской Республики от 29 ноября 2005 года N 676-ЗИД-III (САЗ 05-49), Указом Президента Приднестровской Молдавской Республики от 3 апреля 2007 года N 256 "Об утверждении Положения, структуры и штатной численности Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики" (САЗ 07-15), с изменениями, внесенными Указом Президента Приднестровской Молдавской Республики от 18 сентября 2007 года N 612 (САЗ 07-39),от 12 января 2008 года N 25 (САЗ 08-1), Приказом Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики от 10 ноября 2006 года N 481 "Об утверждении Положения о Государственной службе ветеринарного и фитосанитарного благополучия Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики" (рег. N 3785 от 19 января 2007 года) (САЗ 07-04), приказываю:

1. Утвердить Инструкцию по лабораторной экспертизе растительных подкарантинных материалов в Приднестровской Молдавской Республике (Приложение).

2. Считать утратившим силу "Руководство по досмотру и экспертизе растительных и других подкарантинных материалов" подпункта 1, подпункта а, пункта 1 Приказа Министерства юстиции Приднестровской Молдавской Республики от 4 марта 2004 года N 134 (регистрационный N 2678 от 25 марта 2004 года) (САЗ 04-13).

3. Направить настоящий Приказ на государственную регистрацию в Министерство юстиции Приднестровской Молдавской Республики.

4. Контроль за исполнением настоящего Приказа возложить на начальника Государственной службы ветеринарного и фитосанитарного благополучия Ткаченко В. Д.

5. Настоящий Приказ вступает в силу со дня официального опубликования.

  г. Тирасполь

13 декабря 2007 г.

    N 727

Приложение
к Приказу Министерства
здравоохранения и социальной защиты
Приднестровской Молдавской Республики
от 13 декабря 2007 года N 727

ИНСТРУКЦИЯ
по лабораторной экспертизе
растительных подкарантинных материалов
в Приднестровской Молдавской Республике

1. Общие положения

1. Государственная служба ветеринарного и фитосанитарного благополучия Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики проводит систему карантинных мероприятий, включающих в себя лабораторную экспертизу подкарантинной продукции (материалов, грузов) поступающих в Приднестровскую Молдавскую Республику из-за границы, а также отечественных растительных материалов различных категорий и назначений.

2. Контроль за осуществлением работ по лабораторной экспертизе растительных подкарантиных материалов в Приднестровской Молдавской Республике осуществляется Министерством здравоохранения и социальной защиты через Государственную службу ветеринарного и фитосанитарного благополучия.

3. Мероприятия по проведению лабораторной экспертизы растительных подкарантиных материалов проводятся в соответствии с Законом Приднестровской Молдавской Республики от 11 марта 2004 года N 395-3-III "О фитосанитарном карантине" (САЗ 04-11), с изменениями и дополнениями, внесенными Законом Приднестровской Молдавской Республики от 29 ноября 2005 года N 676-ЗИД-III (САЗ 05-49) и другими нормативными правовыми актами.

4. Проведение лабораторной экспертизы растительных подкарантинных материалов на территории Приднестровской Молдавской Республики возлагается на подведомственные учреждения входящие в систему Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики.

2. Лабораторная экспертиза подкарантинных материалов

5. Лабораторная карантинная экспертиза растительных материалов и почвы - одно из наиболее ответственных звеньев системы карантинных мероприятий препятствующее проникновению и распространению на территории Приднестровской Молдавской Республики вредителей, возбудителей болезней растений и сорняков.

Лабораторная экспертиза включает:

а) проведение анализов - энтомологического, фитопатологического, вирусологического, бактериологического, фитогельминтологического и на сорняки, с целью выявления вредителей, возбудителей болезней растений и сорняков;

б) определение видовой принадлежности обнаруженных объектов;

в) заключение специалистов лаборатории о потенциальной опасности выявленных объектов.

6. На основании результатов лабораторной экспертизы каждого образца и оценки, обнаруженных в нем объектов государственный фитосанитарный инспектор должен определить карантинное (фитосанитарное) состояние всей партии груза и назначить те или иные карантинные мероприятия.

7. В карантинные лаборатории на экспертизу поступают самые разнообразные растительные материалы как импортного происхождения, так и отечественные. Это главным образом подкарантинные материалы, требующие сложных и тщательных лабораторных исследований.

8. Всесторонней карантинной экспертизе подвергаются:

а) посылки с саженцами, черенками, цветочными луковицами, клубнями, корневищами и другими посадочными материалами, а также с семенами культурных и диких растений, адресованные научно-исследовательским организациям;

б) почтовые бандероли с образцами семян декоративных, лекарственных, тропических и субтропических растений;

в) средние образцы от больших товарных партий посевных материалов, растительного промышленного сырья, продовольственного зерна, пряностей, орехов, свежих фруктов, овощей и других подкарантинных материалов, отобранные государственным фитосанитарным инспектором в процессе досмотра;

г) образцы промышленных отходов от переработки импортного растительного сырья, в частности семена хлопчатника из импортного хлопковолокна;

д) образцы почвы, отобранные государственным фитосанитарным инспектором при досмотре некоторых грузов, а также взятые при обследовании;

е) подкарантинные вложения, временно изъятые государственным фитосанитарным инспектором из продовольственных посылок, адресованных физическим лицам;

ж) экспортные образцы посевных и посадочных материалов отечественного происхождения, направляемые научными организациями за границу в порядке международного научного обмена.

9. Кроме того, в лабораторию поступают обнаруженные государственным фитосанитарным инспектором при досмотрах и обследованиях насекомые, семена сорных растений, целые растения или их части с признаками заболеваний для определения и подтверждения видового состава карантинного объекта.

10. Лабораторная экспертиза должна производиться качественно и тщательно. Специалисты лаборатории должны знать внешние признаки всех стадий развития не только карантинных объектов, но и широко распространенных массовых вредителей и болезней растений, семян сорных растений.

11. Очень важно, чтобы проверка была быстрой, а заключение о карантинном состоянии материала, данное специалистом лаборатории было квалифицированным.

12. Общее заключение о результатах всесторонней экспертизы должно быть дано в течение двух-трех дней, а по отношению к живому растительному материалу (саженцы, черенки, цветочные луковицы, клубни и другие) самое позднее на следующий день с момента поступления в лабораторию.

В случае необходимости сложных и длительных исследовании (бактериологических, фитопатологических, гельминтологических, рентгенографических) максимальный срок задержки материалов и заключений по их карантинному состоянию не должен превышать одного месяца, с момента поступления в лабораторию.

13. Процесс лабораторной экспертизы по возможности не должен задерживать транспорт, нарушать работу промышленных и торговых организаций и, что особенно важно, влиять на своевременность сева в хозяйствах, куда поступает посевной и посадочный материал.

14. Любой вид экспертизы следует организовывать так, чтобы была исключена не только возможность пропусков непроверенного материала, но также случайного заражения или засорения образцов.

15. К полученному из-за границы посевному и посадочному материалу надо относиться бережно. Поэтому, если полученный пакет, оказался разорванным или с расклеившимися швами и семена могут из него высыпаться, его необходимо отремонтировать или заменить новым, а разорванный со всеми имеющимися в нем надписями обязательно положить в новый пакет. Если в посылке или бандероли оказались смешанные и обезличенные семена, случайно высыпавшиеся из нескольких плохо заклеенных или разорвавшихся пакетов, то их необходимо собрать и ссыпать в отдельный пакет и, сделав на нем соответствующую надпись, поместить в общую упаковку.

16. Недопустимо в процессе экспертизы путать этикетки, смешивать семена, черенки или другие материалы из разных образцов. Случайно упавшее во время работы на пол семечко нельзя класть в пакет с остальными семенами, если нет полной уверенности, что оно выпало из него. Такое семечко следует уничтожить, разрезав его, и проверив, не поражено ли оно внутри вредителем.

17. Специалисты лаборатории должны соблюдать следующие основные правила:

а) не оставлять без присмотра распакованные растения и высыпанные для экспертизы семена;

б) начатую экспертизу каждого образца обязательно закончить и только после этого в случае необходимости прервать работу;

в) не вскрывать сразу несколько поступивших одновременно посылок или образцов;

г) материалы, анализ которых приходится отложить до следующего дня, сохранять, не вскрывая, в специально отведенном для этого запирающемся шкафу, а тюки и ящики с живыми растениями (черенки, саженцы) - в прохладном месте, поддерживая влажность упаковочного материала.

18. Стол, на котором проводится экспертиза, должен быть широким, покрыт большим настольным стеклом и хорошо освещен.

19. Перед началом экспертизы необходимо расположить на столе все, что может понадобиться во время работы: оптические и другие приборы, инструменты, посуду, реактивы, материалы.

20. Необходимо отвести определенные места для образцов - растительных материалов, проанализированных, еще не подвергавшихся анализу, а также для отходов: ненужных остатков вскрытых семян, отбросов, скапливающихся во время экспертизы и других.

21. При лабораторной экспертизе необходимо использовать карманную лупу с небольшим увеличением 6-10 Х бинокулярной лупой, глазной часовой лупой. Во многих случаях просмотр материала необходимо проводить с помощью бинокуляра. Общий просмотр мелких семян надо проводить сначала при небольшом увеличении (12,5 или 25Х), а в случае необходимости при более сильном (50 или 87 X). Черенки, саженцы и другие материалы сначала необходимо осмотреть с помощью 10-15 Х лупы, а затем для осмотра подозрительных мест использовать бинокуляр.

22. Для рассматривания при определении видов мелких насекомых или деталей строения тела необходимо пользоваться микроскопом. Для поштучного просмотра, переработки и анализа, больших образцов семян, особенно таких легко раскатывающихся, как горох, семена крестоцветных и других, чаще всего пользуются эмалированными белыми фотографическими или менее глубокими торговыми кюветами размером 20 Х 25, 30 Х 40 см. и другие.

23. Небольшие образцы семян можно просматривать на листке белой плотной бумаги с загнутыми с трех сторон краями. Во избежание заражения семян других образцов спорами грибов или бактериозами, а также, если обнаружены явные признаки болезни или зараженность вредителями, в стадии яиц или личинок первого возраста, бумагу следует менять после каждого образца. Для просмотра небольших образцов семян рекомендуется пользоваться лотками из белой пластмассы, которые дезинфицируют 96 % спиртом после каждого образца.

24. После окончания экспертизы на столе и на полу вокруг стола с помощью щетки-сметки необходимо подобрать все растительные остатки, частицы мха, упаковочной бумаги и другой мусор, и все это сжигают. Клеенку и настольное стекло продезинфицировать 96%-ным спиртом, бумагу на которой просматривали семена уничтожить.

25. Все обнаруженные в процессе энтомологической, фитопатологической и других видов экспертизы карантинные и некарантинные объекты сразу помещают в отдельные пробирки, соответствующим образом фиксируют и вкладывают немедленно внутрь каждой пробирки этикетку, написанную тушью чертежным пером на тонкой пергаментной бумаге (но не на кальке!).

26. Сведения на этикетке следует располагать всегда в определенном порядке:

а) номер протокола экспертизы;

б) название страны происхождения материала;

в) место обнаружения (город, местонахождение пункта обнаружения);

г) латинское или русское название растения или название продукта;

д) в чем, на чем или среди чего, в какой стадии и, в каком состоянии обнаружен вредитель, заболевание или семена сорняка;

е) фамилия лица, проводившего экспертизу;

ж) дата проведения экспертизы.

27. Если собранный объект удалось сразу определить, то есть установить его родовое и видовое латинское название, то их пишут на второй этикетке, вкладываемой в ту же пробирку.

В случае если удалось установить только род, к которому принадлежит данный объект, то пишут название рода и после него ставят "sp". Это означает, что проводивший определение по тем или иным причинам не смог определить, к какому виду относится данный объект.

28. На каждый обнаруженный объект сразу составляется отдельная "карточка обнаружения", в которой записывают все сведения о нем в следующем порядке:

а) в левом верхнем углу номер протокола экспертизы и под ним дата ее проведения;

б) в верхней строке (если объект определен) пишут латинские родовое и видовое название объекта, сокращенную фамилию автора вида или "sp", если объект не определен до вида. В некоторых случаях здесь же в скобках указывают название семейства, к которому принадлежит объект;

в) под названием объекта указывают, в какой стадии и в каком состоянии он обнаружен, а в некоторых случаях количество найденных экземпляров;

г) в следующей строке - латинское или русское название растения, в котором или на котором найден объект, или название поврежденного продукта;

д) ниже указывают, какая часть растения была повреждена вредителем или поражена болезнью;

е) затем пишут название страны происхождения данного материала, как и когда он прибыл, кому адресован;

ж) внизу пишут фамилию государственного фитосанитарного инспектора, проводившего досмотр, номер этикетки и дату досмотра, а также фамилию специалиста, проводившего экспертизу и определившего данный объект.

з) "карточки обнаружения" хранятся у заведующего карантинной лабораторией и являются рабочими документами для составления отчетов и для наведения справок.

29. Обнаруженные при досмотре и экспертизе карантинные объекты, отсутствующие в Приднестровской Молдавской Республике, и другие виды насекомых, паразитических нематод, микропрепараты возбудителей грибных и бактериальных болезней растений, семена и плоды сорных растений, а также части растений, поврежденные вредителями, с признаками заболеваний и поражений нематодами, хранят в лаборатории, как образцы-документы, подтверждающие данные отчетных сводок обнаружений. Весь этот материал должен быть снабжен аккуратными этикетками и систематизирован. Хранить его следует в таком порядке, чтобы в любое время можно было найти нужный объект. Объекты, систематическое положение которых, сразу не удалось точно установить, также необходимо сохранять, так как позже они могут быть определены, понадобятся для сравнения с другими материалами или для отсылки на определение специалисту.

30. После окончания отчетного года и получения заключения по годовому отчету, материалы-документы, представляющие научную ценность, переводят в лабораторную систематическую коллекцию.

31. Обнаруженных насекомых, клещей, нематод, возбудителей грибных и бактериальных заболеваний и семена сорняков каждый специалист лаборатории определяет самостоятельно по возможности до вида, пользуясь имеющимися коллекциями, определителями, сводками и другой литературой.Если обнаруженные объекты не поддаются определению, их направляют в лабораторию защиты растений Государственного учреждения "Приднестровский научно-исследовательский институт сельского хозяйства". Карантинные и близкие к ним виды вредителей, возбудителей болезней растений и сорняков, а также широко распространенных массовых вредителей специалист лаборатории должен определить самостоятельно.

3. Порядок проведения лабораторной экспертизы подкарантинных
материалов

32. Любой материал, поступающий в карантинную лабораторию на экспертизу, еще до его регистрации обязательно должен быть проверен энтомотологом. В помещении, где вскрывают посылки или образцы, окна и форточки, особенно в летний период, должны быть закрыты или затянуты марлей, густой металлической или капроновой сеткой. Энтомолог, приступая к вскрытию посылки, должен предусмотреть возможную пораженность ее насекомыми, в активном состоянии и иметь наготове все необходимое для предотвращения разлета и их расползания.

33. На каждый поступивший от государственного фитосанитарного инспектора образец, специалисты лаборатории должны выписать протокол экспертизы по установленной форме.

Протокол является официальным документом, в который специалисты лаборатории обязаны записывать результаты экспертизы и ставить свою подпись.

34. После энтомологической экспертизы, которая включает и акарологическую экспертизу, то есть выявление пораженности клещами, исследуемый материал вместе с протоколом экспертизы передается фитопатологу.

35. Специалист-фитопатолог должен провести экспертизу на наличие в материале карантинных и других болезней, проанализировать также почву, если она имеется в образцах, проверяя её, на зараженность возбудителями карантинных заболеваний растений, и передать посылку на бактериологическую экспертизу.

36. Гельминтологической экспертизе подвергаются все растительные материалы (семена, саженцы, луковицы, корневища, рассада), а также имеющаяся в образцах почва, все это необходимо проверять на наличие карантинных и других особо опасных видов нематод. Затем образец передается специалисту по сорным растениям, который должен проанализировать все образцы на наличие примеси семян карантинных или иных опасных видов сорняков, а также изъять образцы запрещенных к ввозу семян карантинных сорняков.

37. После окончания всех исследований протокол экспертизы следует передать заведующему лабораторией, который, в соответствии с результатами экспертизы, выписывает свидетельство карантинной экспертизы и вручает его государственному фитосанитарному инспектору.

38. На основании результатов экспертизы государственный фитосанитарный инспектор принимает решение:

а) направить материал на обеззараживание;

б) разрешить выдачу получателю с условием высева или высадки его для дополнительного испытания в соответствующем карантинном питомнике;

в) выпустить для использования по назначению без каких-либо карантинных ограничений.

39. Посылки или бандероли с семенами или посадочным материалом, в которых обнаружены живые карантинные или некарантинные вредители, обеззараживают фумигацией в вакуумной или безвакуумной камере или в герметически закрывающейся емкости.

4. Правила карантинной профилактики

40. Для предотвращения разлета, расползания или разноса опасных вредителей и возбудителей заболеваний растений специалисты, проводящие экспертизу растительных или иных материалов, особенно прибывших из других стран, должны соблюдать правила карантинной профилактики. Работать следует в белых халатах, которые при выходе за пределы лаборатории надо снимать, предварительно осмотрев.

41. При энтомологической экспертизе:

а) может выясниться, что материал заражен каким-либо карантинным, неизвестным или отсутствующим в республике вредителем, находящимся в стадии активно расползающихся мелких личинок или яиц;

б) в случае обнаружения пораженности образца карантинным вредителем начинать экспертизу следующего образца можно только после того, как настольное стекло будет протерто ватой, смоченной 96%-ным спиртом;

в) всю стеклянную посуду, использовавшуюся во время экспертизы материала, пораженного капровым жуком (банки, чашки Петри, пробирки и проч.) следует сразу обеззаразить сухим жаром или кипячением. Необходимо обеззаразить кипячением сита, если ими пользовались для просева материала, оказавшегося пораженным личинками капрового жука;

г) бумагу, на которую высыпали пораженный этим вредителем материал, необходимо немедленно сжечь или тщательно протереть ее с обеих сторон 96%-ным спиртом;

д) все инструменты, употреблявшиеся при экспертизе образца, пораженного этим опасным вредителем необходимо погрузить в 96%-ный спирт, а затем обтереть чистой тряпочкой;

е) кюветы или лотки, в которых находился пораженный капровым жуком материал, тщательно протереть внутри и снаружи ватой, обильно смоченной в 96%-ном спирте, которую потом сразу сжечь.

42. При фитопатологической, бактериологической и вирусологической экспертизах:

а) в случае обнаружения подозрительных на заболевание, а также явно зараженных образцов, особенно важно тщательно обеззаразить спиртом настольное стекло, на котором проводились работы, а также все предметы, бывшие в употреблении (иглы, скальпели, пинцеты). Остатки растительного материала и упаковки удаляют со стола и сжигают;

б) предметные, покровные и часовые стекла, центрифужные и химические пробирки, а также фарфоровые ступки, пестики и другую посуду следует использовать только для работы с одним образцом. После этого их следует кипятить в воде в течение двух часов, а затем хорошо промыть в проточной воде;

в) сита после каждого просеивания почвы тщательно очищают мягкой тряпочкой, а затем обтирают спиртом, кипятить 2 часа и промывают в проточной воде. Тряпочки после обтирания сита сжигают;

г) почву, зараженную возбудителем рака картофеля, после анализа рассыпают тонким слоем на железном противне и прокаливают в сушильном шкафу.

43. Остатки почвы после гельминтологических анализов ссыпают в ведро с 5%-ным раствором формалина и спустя 6 часов выливают в канализацию. Так же обеззараживают бумажные фильтры.

5. Подготовка карантинных объектов к экспертизе

44. Технология подготовки объекта для идентификации очень проста, и тем не менее около 25 % поступающего в карантинную лабораторию материала оказывается необратимо испорченным.

45. Наиболее массовой ошибкой является упаковка сочных плодов и листьев в полиэтиленовые пакеты, где они быстро портятся, а вместе с ними и вложенная внутрь этикетка.

46. Большие трудности для эксперта возникают и в случаях, когда нежных насекомых, таких, как галлицы и самцы щитовок, пересылают прямо на клеевых ловушках.

Полиизобутилен, являющийся основой энтомологических клеев, размягчает хитиновый покров, после чего извлечь насекомое из ловушки практически невозможно. Поэтому важно выполнять правила фиксации и пересылки карантинных объектов.

47. Насекомые:

а) взрослых насекомых умерщвляют в морилке с эфиром или дихлорэтаном. Затем их высыпают на лист бумаги и раскладывают по отрядам и семействам. Особей, требующих более тщательного определения, помещают в стеклянные пробирки и снабжают этикеткой, располагая ее таким образом, чтобы надпись можно прочесть, не вынимая. Лучше всего заполнять этикетку простым карандашом. После этого пробирку закупоривают ватным тампоном так, чтобы он не выступал за ее верхний край. Желательно вкладывать в пробирку и образец повреждений, отделив его от насекомого ватным тампоном;

б) образцы коры с колониями щитовок и листья с колониями личинок белокрылок укладывают на слой ваты толщиной 0,5-1 см. Вату с насекомыми помещают в сложенный вдвое лист рабочей бумаги, на внутренней стороне которого записывают сведения о месте и времени сбора растений. Эти образцы можно также положить в этикетки, используемые для хранения семян.

Галлиц, взрослых белокрылок, трипсов хранят в 96 % спирте, но лучше использовать жидкость Конике.

в) гусениц, личинок и куколок жуков перед фиксацией на 2-3 минуты помещают в крутой кипяток или обваривают. Это необходимо для того, чтобы личинки не потемнели при дальнейшей фиксации;

г) если длительное хранение личинок и гусениц не предполагается, их после ошпаривания кипятком фиксируют в растворе поваренной соли. Для более надежной фиксации используют 70%-ный спирт (70 см3 абсолютного спирта разбавляют водой до 96 см3).

48. Грибные заболевания:

а) пораженные болезнями части растений гербаризируют следующим образом: отдельные листья или побеги с листьями в расправленном виде кладут на листы бумаги (лучше фильтровальной), перекладывают бумагой и помещают под пресс. Затем образец, состоящий не менее чем из 10 экземпляров пораженных растений, снабжают этикеткой, где указывают культуру, сорт, место сбора, дату и кем собран, заворачивают в несколько слоев бумаги и направляют в лабораторию. Нельзя пересылать образцы в полиэтиленовых пакетах;

б) у сочных плодов и ягод вырезают пораженные участки с обязательным захватом здоровой ткани и высушивают между листами бумаги. Плоды, их части, клубни, коробочки можно фиксировать в 70%-ном спирте или 4-5%-ном водном растворе формалина с добавлением кристалликов медного купороса;

в) средний образец плодов и овощей, направляемых на экспертизу, составляют из подозрительных на заболевание экземпляров, но их объем должен соответствовать норме, рекомендованной для среднего образца данной продукции. Средний образец зерна должен включать не только больные зерна с явными признаками поражения, но и внешне здоровые.

49. Бактериальные болезни:

а) с зараженных деревьев берут срезы коры, кусочки веток, побегов, листья, соцветия, завязи. При этом обязательно захватывают кусочки здоровых тканей, чтобы была видна граница между здоровой и пораженной тканью. Образцы каждого copтa плодовых упаковывают в отдельные пакеты или коробки, снабжают этикеткой;

б) для бактериологического анализа отбирают семена сморщенные, щуплые, но с неповрежденной оболочкой. Помимо подозрительных, на наличие инфекции, средний образец должен включать здоровые семена;

в) в связи с тем, что возбудитель ожога плодовых в срезанных частях растений сохраняется не более 7 дней, для бактериального анализа в карантинную лабораторию должен направляться свежесобранный материал не позднее, чем на третьи сутки со времени сбора. Чтобы обеспечить при этом жизнеспособность бактерий, а также сохранность материала, растения или их части перекладывают листами фильтровальной бумаги;

г) для отправки материала с признаками гнилей отбирают растения или их части со слабым проявлением загнивания, заворачивают в марлю и подсушивают на сквозняке. Так же поступают с растениями, пораженными сосудистыми бактериозами;

д) пересылают материал в решетчатых деревянных ящиках, переложив образцы стружкой или соломой. Нельзя использовать для упаковки полиэтиленовую пленку, она приводит к повышению влажности, развитию сапрофитных микроорганизмов и гибели образцов.

50. Вирусные болезни:

а) листья плодовых и цитрусовых культур с симптомами вирусных болезней гербаризируют аналогично пораженным грибными заболеваниями. Для контроля обязательно высылают образцы здоровых листьев;

б) зараженные плоды косточковых культур сначала выдерживают в растворе медного купороса (4 грамма на 1 литр дистиллированной воды) в течение 3-4 часов, затем раствор сливают, плоды промывают водой и помещают в 40%-ный раствор формалина (25 миллиграмм на 1 литр дистиллированной воды) на 3-4 дня;

в) для анализа методами электронной микроскопии и включений необходимы по возможности более свежие образцы, поскольку в сухих растительных остатках многие вирусы сохраняются недолго. Растения заворачивают в умеренно увлажненную фильтровальную бумагу или газету и помещают в полиэтиленовые мешочки с отверстиями для доступа воздуха. Для контроля присылают здоровые листья и побеги;

г) черенки срезают с четырех сторон дерева (желательно длиной 20-25 см). Чтобы они не засохли, верхние и нижние срезы парафинируют, каждую коробку снабжают этикеткой;

д) свежие плоды для пересылки заворачивают в пергаментную бумагу и снабжают этикеткой.

51. Нематоды:

а) под действием фиксирующей жидкости червеобразные нематоды скручиваются, что исключает возможность их исследования под микроскопом. Поэтому нематод необходимо анестезировать. Это достигается их нагреванием до температуры 500 С, но не выше, или помещением в 1 %- ный раствор - хлоралгидрата. Оцепенение и вытягииание нематод наступают в течение часа. После этого в жидкость добавляют формалин с таким расчетом, чтобы крепость полученного раствора составила 4-5 %;

б) если нематод мало, то их можно поместить в небольшое количество воды и залить 70%-ным спиртом, нагретым до кипения. Спирт рекомендуется для фиксации нематод с толстой трудно проницаемой кутикулой. Таким же образом фиксируют отдельные части растений, поврежденных нематодами.

в) при проведении обследовательских работ на картофельную нематоду желательно пересылать не образцы почвы, а выделенные цисты нематод. Для определения жизнеспособности цист их не следует фиксировать. Выделенные цисты помещают на фильтровальную бумагу, чуть увлажняют, заворачивают в полиэтиленовую пленку, оставляют с обоих концов отверстия для доступа воздуха и в таком виде сохраняют до пересылки, снабдив этикеткой.

6. Пересылка карантинных объектов

52. Пересылка образцов требует соблюдения необходимых мер предосторожности: упаковка производится в двойной пакет и коробки с прочными стенками, чтобы исключить возможность рассыпания и повреждения образца. Особое внимание следует обращать на сохранность этикетки.

53. Почва в образцах на выявление рака картофеля должна быть сухой, а этикетка прилагается к пакету, но не вкладывается внутрь.

54. Любой материал, поступивший в карантинную лабораторию на экспертизу, еще до регистрации проверяется энтомологом. Поэтому вскрытие посылок и образцов с растительными материалами проводится энтомологом или в его присутствии в условиях, гарантирующих от случайных разлётов и расползания вредителей или разноса их на одежде работающих. В помещении, где вскрывают посылки или образцы, окна и форточки, особенно летом, закрывают или затягивают марлей, густой металлической или капроновой сеткой.

55. Энтомолог должен предусмотреть возможность заражения образцов насекомыми в активном состоянии и иметь наготове все необходимое для предотвращения их разлёта и расползания. При наличии в посылке таких насекомых ее следует быстро закрыть, обернуть пленкой и направить на фумигацию или поместить на 5-10 минут в холодильник. Затем посылку можно вновь открыть, выбрать всех насекомых, а растительный материал поместить в холодильник.

56. В лаборатории необходимо соблюдать порядок проведения анализов каждого образца, посылки, бандероли. Все поступающие растительные материалы, прежде всего, регистрируют в журнале. На каждую посылку, бандероль, образец или иной материал выписывают протокол экспертизы. Он сопровождает материал в течение всего процесса анализа. Этот основной документ, в котором специалисты лаборатории записывают результаты анализа и ставят свою подпись, хранится в лаборатории. После энтомологического анализа исследуемый материал вместе с протоколом передается специалисту-фитопатологу.

57. Фитопатолог проводит анализ на наличие в материале карантинных и других опасных болезней растений, проверяет почву, если она имеется в образцах, на зараженность возбудителями карантинных болезней растений и передает посылку бактериологам.

58. При проведении бактериологического анализа выявляются возбудители бактериальных болезней карантинного значения.

59. Очередному фитогельминтологическому анализу подвергаются все растительные материалы (семена, саженцы, луковицы, корневища, рассада), а также имеющаяся в образцах почва на наличие карантинных и других опасных видов нематод.

60. Затем посылка передается специалисту по сорным растениям, который анализирует образцы на наличие семян карантинных и иных опасных видов сорняков, изымает образцы запрещенных к ввозу семян карантинных сорняков.

7. Методы анализа подкарантинных материалов

61. Энтомологический анализ:

а) его задача - выяснение карантинного состояния импортируемых материалов в отношении насекомых и клещей, установление наличия или отсутствия зараженности другими опасными вредителями;

б) в зависимости от характера и объема проверяемого материала он проводится различными методами: поштучного просмотра или просеивания, флотации, рентгенографии, макролюминесцентным, биологическим.

62. Метод поштучного просмотра:

а) наиболее часто и широко используется при анализе образцов различных семян, зерна, крупы и других подобных материалов. Для разборки и перемещения семян пользуются шпателем или скальпелем;

б) приступая к экспертизе посылки или почтовой бандероли с образцами семян в бумажных пакетиках, осматривают поверхность пакетов, проверяя, нет ли в бумаге отверстий, прогрызенных насекомыми. Семена в таких пакетах просматривают в первую очередь;

в) после этого приступают к просмотру других семян. Вскрывают один из пакетов и высыпают семена в кювету, лоток или на лист бумаги равномерным слоем толщиной 1 -2 см так, чтобы они были расположены в дальней части, а перед работающим оставалось свободное место, куда он будет постепенно перемещать семена;

г) затем выделяют и помещают в пробирки семена, имеющие наружные выгрызы, отверстия, деформированные, с приклеенными к поверхности яйцами насекомых, с "окошечками", со скрепленными паутиной комочками экскрементов гусениц, с другими признаками зараженности вредителями;

д) всех обнаруженных насекомых, их части и экскременты выбирают из образца с помощью тонкого шпателя, аспиратора, смоченной тонкой кисточки или иглы, помещают в одну или несколько пробирок и закрывают плотным ватным тампоном. Туда же или в отдельные пробирки кладут отобранные из образца поврежденные семена, подлежащие вскрытию. Семена с предполагаемой внутренней зараженностью сразу вскрывают;

е) образцы семян, поступившие в матерчатых мешочках, или средние образцы массой 1 кг, отобранные от больших партий, анализируют, высыпая их в кювету частями;

ж) если при анализе найдены мертвые бабочки или только части тела насекомых, по внешним признакам которых нельзя установить видовую принадлежность, необходимо разварить их щелочи и изготовить микропрепараты;

з) многие личинки, будучи потревоженными, стремятся уйти с поверхности вглубь, поэтому материал надо осматривать очень внимательно, с помощью лупы или под бинокуляром.

63. Метод просеивания семян:

а) для выявления вредителей в образце семена просеивают через набор почвенных сит: в верхних фракциях остаются насекомые более крупные, чем семена, в среднюю попадают мелкие насекомые, а в самую нижнюю - экскременты, отдельные части насекомых, а также клещи;

б) нельзя использовать сита для просеивания материалов, в которых обнаружены личинки капрового жука, а также родственных ему видов или если только предполагается их наличие: мельчайшие личинки (длиной менее 0.5 мм) успевают при этом забраться в щели между ободом и сеткой, и остается незамеченными;

в) для выявления личинок в таких продуктах, как мука, крахмал или мелкая крупа, исследуемый материал рассыпают тонким слоем (менее 0,5 см) на бумаги, приглаживают и выравнивают фанерой, картоном или стеклом. Если в данной пробе имеются живые личинки, они через несколько минут переползают, оставляя за собой заметный след, по которому их легко обнаружить;

64. Метод флотации:

а) может применяться, для анализа образцов семян маковых, зернобобовых культур, орехов, косточек плодовых и др. В растворе всплывают неполноценные семена, поврежденные и зараженные вредителями. Флотация облегчает обнаружение скрытно развивающихся вредителей таких, как зерновки, долгоносики, толстоножки, семяеды, зерновая моль;

б) для флотации используют воду, раствор поваренной соли или селитры различной концентрации. Для хлебных злаков (при исследовании на зараженность долгоносиками, берут 570-730 г селитры (NaNO3) на 1 литр воды, температура раствора около 150. Для мелкосеменных сортов гороха и других бобовых, зараженных зерновками, применяют 30%-ный раствор селитры, а для крупносемянных 50%-ный;

в) образец семян высыпают в сосуд с прямыми стенками, заполненный раствором или водой, хорошо перемешивают, а затем быстро, не дав набухнуть, извлекают шпателем или ложкой все всплывшее на поверхность семена раскладывают их для просушки на фильтровальную бумагу, сложенную в несколько слоев. Жидкость сливают, семена, опустившиеся на дно, несколько минут промывают проточной водой в этом же сосуде и раскладывают для просушки;

г) все всплывшие семена вскрывают, извлекают обнаруженных вредителей, определяют их видовую принадлежность, стадию развития, состояние. Вскрывать семена, орехи и косточки следует осторожно, чтобы не повредить находящихся внутри насекомых.

65. Метод рентгенографии:

а) хорошо выявляет скрытую зараженность семян вредителями. Рентгенографирование проводится с помощью рентгеновских аппаратов, работающих в мягких диапазонах и не дающих гамма-излучения;

б) семена раскладывают в один слой в специальные плоские коробочки. Под коробочки подкладывают незасвеченную рентгенопленку, помещенную в (светонепроницаемые конверты-кассеты из черной бумаги. Подготовленные таким образом семена подвергают рентгеновской съемке с соблюдением правил по технике безопасности;

в) по окончании съемки коробки осторожно, чтобы не сместились семена, переносят на другой стол, а конверты-кассеты с заснятой пленкой проявляют при темно-красном свете и фиксируют;

г) промытые и высушенные рентгенограммы исследуют, пользуясь лупой с 6-кратным увеличением или бинокуляром в проходящем свете, отмечают на них тушью все семена, подлежащие изъятию из образца;

д) на рентгенограммах хорошо видны семена, внутри которых находятся гусеницы, личинки и куколки жуков, перепончатокрылых и других вредителей, а также выгрызенные ими полости, заполненные экскрементами. По характеру теневого изображения можно различить даже стадии развития насекомых;

е) с помощью негатоскопа безошибочно находят в соответствующих местах каждой коробки семена, содержащие вредителей, осторожно вынимают их пинцетом и вскрывают под бинокуляром;

ж) этот метод применяют главным образом для выявления скрытой зараженности семян декоративных, мальвовых (хлопчатник, кенаф), а также зернобобовых культур (фасоль, соя, маш). Не подлежат рентгеноэкспертизе семена люцерны и декоративных мальвовых из стран Европы.

66. Макролюминесцентный метод:

а) применяют для быстрого выявления зараженности вредителями семян, черенков и саженцев. Особенно эффективен при анализе больших образцов семян, в которых возможна слабая зараженность карантинными и некоторыми другими видами зерновок, например китайской, четырехпятнистой, а также бразильской бобовой. Приклеенные к поверхности семян яйца названных вредителей ярко люминесцируют в ультрафиолетовых лучах и легко обнаруживаются даже при слабой степени зараженности;

б) этот метод может быть с успехом использован и для выявления скрытых в трещинах коры черенков и саженцев восковых выделений некоторых насекомых, например кровяной тли, мучнистых червецов родов Pseudococcus, Xylococcus и др., так как воск ярко люминесцирует на фоне темной коры;

в) для макролюминесцентного метода используют аналитическую ртутно-кварцевую портативную лампу типа ЛЮМ или Л-84 с лампой ПРК-4 и светофильтром УФС-3, пропускающим только невидимые ультрафиолетовые лучи. В качестве источника ультрафиолетовых или сине-фиолетовых лучей может быть использован и люминесцентный осветитель типа ОИ-18 с набором светофильтров. Применяют его вместе с бинокуляром, если необходимо рассмотреть при некотором увеличении детали тех или иных объектов. Работа проводится в затененном помещении;

г) хорошие результаты макролюминесцентный метод дает при исследовании образцов семян зернобобовых культур с темной или пестрой оболочкой.

67. Биологический метод:

а) часто при досмотрах грузов, лабораторной экспертизе и обследованиях находят вредителей в предимагинальных стадиях развития. В этих случаях по внешним признакам сложно, а иногда и невозможно точно установить вид. Поэтому, если найдены неизвестные специалисту яйцекладки, живые личинки или куколки вредителей, их приходится доводить до стадии, поддающейся определению;

б) проведение анализа биологическим методом бывает различным в зависимости от исследуемого материала. Приводим порядок работы этим методом на различном растительном материале.

68. Саженцы и прививочный материал:

а) для проведения анализа готовят рабочее место, затем приступают к вскрытию посылок, постепенно освобождая саженцы (черенки) от мха, влажной ваты или другого материала, которым переложены отдельные связки. Берут по одному черенку или саженцу и внимательно осматривают его поверхность с помощью лупы. Остальные связки черенков прикрывают влажным мхом, ватой, чтобы они не подсыхали;

б) осмотр саженцев обычно начинают с корневой системы. Имеющиеся остатки почвы счищают скальпелем в чашку Петри и проверяют ее под бинокуляром на наличие насекомых или клещей. Особое внимание обращают на корневую шейку. Если есть наружные признаки, указывающие на наличие вредителя (буровая мука, экскременты, колонии щитовок, капли камеди), вскрывают соответствующий участок для извлечения насекомых. Мох, вату и другие материалы, которыми обертывают корни, тщательно осматривают на наличие вредителей;

в) патологические вздутия, галлы и наросты разрезают скальпелем и исследуют под бинокуляром;

г) нужно очень внимательно осматривать кору, места разветвления веточек, пазухи под почками, так как в них могут находиться единичные щитовки и другие насекомые. Особенно тщательно исследуют засохшие концы веточек: при разрезании их скальпелем вдоль можно найти гусениц или личинок жуков;

д) скрупулезно осматривают торцовые части (срезы) черенков. Если они покрыты слоем парафина, его осторожно удаляют скальпелем, а по окончании анализа срезы вновь покрывают парафином. При обнаружении щитовок или червецов их осторожно снимают, срезая вместе с кусочком коры или отрезая часть черенка с колонией. Всех вредителей, обнаруженных при экспертизе, собирают и фиксируют.

69. Клубни картофеля:

а) основная задача энтомологическою анализа клубней картофеля - выявление возможной зараженности картофельной молью и прочими опасными вредителями;

б) в начале экспертизы каждый клубень осматривают снаружи, пользуясь лупой. Для обнаружения внутренней зараженности вредителями на клубнях делают неглубокие поверхностные срезы или разрезают их. Чтобы избежать механического повреждения глазков у клубней ценных импортных сортов, срезы надо делать на некотором расстоянии от них. Для предотвращения загнивания поверхность срезов присыпают мелко истолченным древесным углем. Чтобы не допустить заражения здоровых клубней, следует тщательно дезинфицировать нож или скальпель спиртом;

в) в глазках и углублениях на клубнях могут быть обнаружены беловатые яйца картофельной моли. К внешним признакам зараженности молью относятся различимые под сморщившейся кожицей извилистые ходы в слое мякоти. Все клубни, подозрительнее на зараженность молью, необходимо разрезать, чтобы обнаружите ходы, забитые буровой мукой или экскрементами, и извлечь гусениц или куколок вредителя.

70. Луковицы и другие подземные части растений:

а) при вскрытии тары с этой продукцией, чтобы обнаружить вредителей, тщательно осматривают поверхность грузов, щели, оберточную бумагу. Досмотр крупных партий государственный фитосанитарный инспектор проводит на складах или территориях складирования организаций, небольшие образцы доставляют на анализ в лабораторию. Осмотр луковиц ведется поштучно. Луковицы испытывают также на упругость для обнаружения ходов и полостей, выеденных вредителями;

б) после проверки боковых поверхностей осматривают донце луковицы, затем шейку. При осмотре шейки слегка отгибают и отворачивают сухие чешуйки. Здесь часто обнаруживают колонии зимующих тлей, мучнистых червецов;

в) для выявления зараженности трипсами с некоторых луковиц и клубнелуковиц снимают сухую чешую и осматривают открывшуюся поверхность мякоти. Признаком заражения может служить наличие на поверхности мякоти шероховатой, светло-бурой или черной, немного липкой корочки из экскрементов трипсов;

г) на луковицах с прогрызенными отверстиями, чтобы проследить направление хода и обнаружить вредителя, делают скальпелем неглубокий срез мякоти. При исследовании луковиц, имеющих большую ценность, делают срезы, не затрагивая донце и цветочную почку. По окончании экспертизы срез луковицы присыпают древесным углем;

д) луковицы с признаками наличия внутренних полостей разрезают ножом или скальпелем пополам от шейки к донцу, здесь могут быть обнаружены личинки мух и клещи;

е) таким же способом анализируют корневища цветочных культур, обращая внимание на почки, корни и остатки почвы;

ж) иногда импортируют партии пищевого лука и чеснока, которые бывают заражены не зарегистрированной у нас блестянкой (Corpophilus obsoletus Er.) и другими вредителями.

71. Плоды цитрусовых культур:

а) основной карантинный вредитель, встречающийся в импортных плодах цитрусовых культур, - средиземноморская плодовая муха (Ceratitis capitata Wied). В плодах цитрусовых можно обнаружить также большую мандариновую (Tetradacus citri Chen.) и других плодовых мух, гусениц цитрусовой моли (Prays citri Mill.), огневок (Paramyeiois transitella W, Ectomyelois ceratonicae Z.) и другие. На поверхности плодов цитрусовых встречается ряд видов кокцид;

б) наиболее характерные внешние признаки зараженности плодов цитрусовых личинками средиземноморской плодовой мухи - сероватые и более мягкие, как бы промасленные участки, слегка продавливающиеся при прощупывании, и конусовидные бугорки, нередко с подсохшими и побуревшими вершинками в местах уколов яйцекладом или круглые диаметром около 1,5 мм выходные отверстия личинок;

в) плоды, подозрительные на внутреннюю зараженность личинками мухи, детально исследуются. Для этого скальпелем делают сначала поверхностный срез кожуры толщиной примерно 2-3 мм, чтобы выяснить глубину проникновения подозрительного пятна или отверстия. Если обнаружится, что пятно или ход углубляется в мякоть, то делают второй срез в той же плоскости или разрезают плод пополам через подозрительный участок. После этого поверхность разреза исследуют с помощью 7-10Х лупы, раздвигая поврежденные ткани концом скальпеля;

г) внутри плода, сильно поврежденного средиземноморской плодовой мухой, мякоть долек, где питались или питаются личинки, имеет выжатый вид, она как бы измочалена или изжевана.

72. Свежие фрукты:

а) организация досмотра и экспертизы яблок, груш, айвы и других свежих фруктов такая же, как и плодов цитрусовых;

б) учитывая, откуда прибыли плоды, можно предполагать, какими карантинными вредителями они заражены. На поверхности плодов многих культур могут быть обнаружены различные виды червецов и щитовок, в том числе калифорнийская щитовка (Quadraspidiotus perniciosus Corns;.). В случае обнаружения кокцид делают срезы кожицы плодов. В углублениях на плодах часто бывают колонии разных видов паутинных клещей;

в) яблоки, груши, персики, айва, реже абрикосы и сливы, могут быть заражены восточной плодожоркой (Grapnolitha molesta Вusck.), персиковой плодожоркой (Carposina niponensis W.), яблонной мухой (Rhagoletis pomonella Walsh.) и др;

г) среди плодов и ягод, в таре, на упаковочном материале или в самих плодах можно найти гусениц или куколок американской белой бабочки (Hyphantria cunea Drury);

д) характерным признаком наличия гусеницы внутри плода может служить точка вгрызания в виде маленьких уколов. Чтобы убедиться, не является ли какая-нибудь точка, пятнышко или маленькая дырочка на поверхности плода началом хода гусеницы, следует скальпелем сделать тонкий поверхностный срез кожицы. Если при этом откроется ход, нужно разрезать плод, чтобы вскрыть поврежденную часть и извлечь гусеницу. Надо иметь в виду, что гусеницы младших возрастов персиковой и некоторых других плодожорок часто полностью вгрызаются внутрь семян, питаясь их содержимым. В этих случаях их можно обнаружить лишь по мелким крупинкам экскрементов вблизи кончика семечка;

е) определение гусениц проводят по признакам хетотаксии.

73. Виноград и земляника:

а) основная задача анализа - выявление возможной зараженности личинками средиземноморской плодовой мухи и американской белой бабочки;

б) ягоды высыпают на разборочный стол и просматривают.

74. Бананы и ананасы:

а) прибывший из тропических стран груз в начале досматривают внешне, а затем детально - на складах или территориях складирования организаций;

б) при проверке бананов и ананасов можно обнаружить многие виды тропических насекомых. Просматривают их поштучно.

75. Сушеные фрукты:

а) признаки зараженности вредителями - наличие различных фаз развития насекомых, паутины с экскрементами и паутиновых коконов (при зараженности гусеницами) или зернистых экскрементов без паутины (при зараженности личинками жуков). В ряде случаев сушеный урюк. Циники и другие фрукты не имеют явных наружных признаков зараженности. Гусеницы огневок, личинки некоторых жуков и других насекомых проникают в мякоть до самой косточки и развиваются скрытно;

б) начинает с внешнего осмотра тары, после чего берут по 2-3 образца каждого сорта от каждой марки и приступают к детальному досмотру и экспертизе сушеных фруктов и упаковки. Отдельные фрукты, подозрительные на внутреннюю зараженность вредителями, разламывают или разрезают и просматривают на месте. Сушеные фрукты в международных почтовых посылках досматривают и сразу проверяют на зараженность вредителями без отбора образцов для лабораторного анализа.

76. Какао (бобы), кофе (зерна), пряности:

а) внешний вид, детальный досмотр и анализ какао и кофе проводят по той же методике, что и сушеных фруктов. Образцы отбирают от каждой марки или сорта, имеющихся в прибывшей партии;

б) для детального досмотра целесообразно выбирать мешки с самыми темными (ферментированными) какао-бобами, которые бывают наиболее сильно заражены вредителями. Все бобы поштучно вскрывают, предварительно сняв скальпелем сухую оболочку, затем темно-коричневые сморщенные семядоли разламывают на мелкие кусочки;

в) при анализе пряностей в виде семян (тмин, анис, перец) обращают внимание на наличие лётных отверстий, наружных выгрызов, экскрементов, паутины или самих насекомых. Целесообразно просеивать через набор сит весь образец и мусор со дна упаковки.

77. Тара, упаковочные материалы и древесина: экспертизе подлежат упаковочные ящики и другая тара, древесные кряжи, необработанные паркетные плашки - все эти материалы могут оказаться переносчиками вредителей.

78. Фитопатологический анализ:

а) цель карантинного фитопатологического анализа - выявление не только включенных в "Перечень вредителей растений, болезней растений и сорных растений, имеющих карантинное значение для Приднестровской Молдавской Республики", но и других, опасных для сельского хозяйства;

б) при фитопатологическом анализе чаще всего используют макроанализ - наружный осмотр с помощью микроскопа, центрифугирование и биологический метод, а для более точных и углубленных исследований применяют люминесцентный и серологический методы.

79. Макроанализ:

а) обычно начинают с наружного осмотра растительного материала. При этом часто пользуются лупой, бинокуляром или микроскопом. Метод позволяет иногда сразу выявить некоторые болезни, например головню, ржавчину и возбудителей ряда других грибных заболеваний;

б) при наружном осмотре могут быть обнаружены пятнистости, язвочки, разрывы, ненормальные разрастания ткани и другие патологические изменения на различных частях растений (клубнях, луковицах, семенах), на которых нет спороношения грибов. Такой материал отбирают для исследования на зараженность биологическим методом. Для этого помещают его в стерильные чашки Петри на влажную фильтровальную бумагу или на питательные среды в оптимальные для грибов температурные условия с целью получения их плодоношения.

80. Метод центрифугирования:

а) применяют, когда необходимо установить загрязнение поверхности семян спорами головневых, ржавчинных и других грибов;

б) метод состоит в том, что определенное количество семян обмывают водой в пробирке или колбе. Затем воду сливают в центрифужные пробирки и центрифугируют. Споры и все мелкие посторонние частицы, имеющиеся на семенах, при этом осаждаются на дни пробирок. Воду сливают, а из осадка готовят препараты, которые исследуют под микроскопом на наличие спор;

в) этот метод используют и при извлечении покоящихся эооспорангиев возбудителя рака картофеля из почвы.

81. Люминесцентный метод:

а) основан на том, что растительные ткани, помещенные в сине-фиолетовые или ультрафиолетовые лучи, начинают ярко люминесцировать;

б) почти все растительные ткани при рассмотрении их в этих лучах обладают первичной люминесценцией, но она различна по цвету свечения у здоровых и пораженных грибами тканей одного и того же растения. При наличии соответствующей аппаратуры этот метод позволяет в ряде случаев очень точно и быстро выявлять некоторых возбудителей болезней растений.

82. Фитопатологический анализ различных видов растительной продукции:

а) все семена различных культур, содержащихся в образце, высыпают тонким слоем на стекло или в кювету и просматривают с помощью лупы с большим полем зрения. Для осмотра мелких семян применяют бимодулярный микроскоп;

б) семена, на поверхности которых есть плодоношении грибов, отбирают и с помощью микроскопического исследования определяют обнаруженные грибы. Подозрительные на внутреннюю зараженность семена (щуплые, недоразвитые, деформированные) также отбирают и помещают во влажную камеру, чтобы получить плодоношение гриба. Если в условиях влажной камеры на семенах появляется только мицелий, его пересевают на питательную среду и после образования плодоношении определяют выделенный гриб;

83. Анализ пшеницы на выявление индийской головни:

а) возбудитель индийской головни в отличие от других видов головни поражает семена пшеницы частично. Поражение семени начинается с зародышевой части и распространяется вдоль бороздки. Позднее споровая черная масса выступает наружу;

б) семена с такими внешними признаками исследуют с помощью микроскопа. Очень сходное поражение вызывает возбудитель желтой ржавчины пшеницы, телейтоспоры которого морфологически отличаются от спор индийской головни;

в) если при просмотре семян пшеницы индийская головня не обнаружена, то прибегают к анализу центрифугированием. От образца семян (в зависимости от его размера) берут одну или несколько навесок по методу взятия средних проб. Каждую навеску высыпают в центрифужные пробирки и заливают водой. Уровень воды должен быть выше уровня семян на 1 см. Пробирки взбалтывают, воду сливают в центрифужные пробирки и центрифугируют в течение 3-5 минут (в зависимости от скорости центрифуги). Затем осторожно сливают воду из пробирок, оставляя на дне осадок и примерно 0.5 мл воды. Осадок взмучивают и готовят из него препараты, которые просматривают на наличие спор индийской головни под микроскопом при окуляре х 10 и объективе 8. Из осадка каждой пробирки готовят несколько препаратов или просматривают весь осадок, если образец поступил из государства, где болезнь распространена. Обнаруженные споры детально исследуют при окуляре х 10 и объективе 40;

84. Анализ семян кукурузы на выявление возбудителей южного гельминтоспориоза:

а) при экспертизе семян кукурузы применяют метод макроанализа - из среднего образца выбирают семена с серо-буро-черным налетом у зародыша. Если нет плодоношения гриба, семена с налетом надо поместить в чашки Петри и содержать их при температуре 25-28 град. С. На 1-3-й день образуется плодоношение гриба, которое микроскопируют для определения видовой принадлежности;

б) семена, опудренные протравителем, предварительно обмывают водой. Если при макроанализе семена с внешними признаками поражения не обнаружены, го надо применять метод центрифугирования. Для этого от среднего образца отбирают в пробирку как щуплые, поврежденные, так и неповрежденные семена. Водный смыв с них центрифугируют, а центрифугат анализируют обычным путем;

85. Анализ семян подсолнечника на выявление фомопсиса:

а) диагностику возбудителя фомопсиса подсолнечника проводят следующими методами. Для обнаружения гриба в семенном материале из среднего образца отбирают шероховатые, щуплые, покрытые беловатым налетом семена или растительные примеси с наличием пикнид на поверхности. Пораженные участки микроскопируют с целью определении видовой принадлежности возбудителя;

б) при отсутствии видимых признаков поражения от образца отбирают 200-400 семян, промывают их проточной водой в течение 1 часа и дезинфицируют 96 % спиртом или 0.001 % сулемой в течение 4-6 минут. Далее семена 2-3 раза промывают стерильной дистиллированной водой и раскладывают в чашки Петри на 2 % картофельно-глюкозный агар (не более 6-8 семян на чашку) или на увлажненную фильтровальную бумагу (не более 10-15 семян на чашку). Семена инкубируют при температуре 22-27 град. С. Первое наблюдение проводят на 2-4-е сутки. Возбудитель фомопсиса подсолнечника сначала образует белый рыхло-пушистый воздушный мицелий неоднородной плотности, позже колония гриба приобретает местами беловато-серый или желтовато-зеленый оттенок; субстратный мицелий бежевого цвета с темными Вкраплениями. Пикниды гриба появляются на 7-14-е сутки. Анализ пораженных растительных органов (черешков, стеблей) вначале проводят визуально, а затем анатомическим методом (с помощью срезов некротизированной ткани и последующего их просмотра под микроскопом для выявления пикнид и спор гриба). При отсутствии зрелого спороношения гриба проводят выделение возбудителя из пораженной ткани во влажной камере или на питательной среде.

86. Анализ клубней картофеля на выявление рака:

а) клубни картофеля, особенно сортов, восприимчивых к раку, составляющие образец, тщательно осматривают и отбирают подозрительные на заболевание раком. При осмотре особое внимание обращают на глазки, так как на них могут быть выявлены мясистые, с неровной поверхностью наросты рака. Размер наростов сильно варьирует, но при экспертизе чаще всего встречаются клубни с очень мелкими, едва заметными наростами, цвет которых вначале белый, затем коричневый, темно-коричневый и черный. Наросты, бородавки или иные разрастания в глазках клубней, а также остатки почвы необходимо исследовать под микроскопом на наличие покоящихся зооспорангиев возбудителя рака. Для этого с поверхности нароста делают очень тонкий срез, помещают его в каплю воды и просматривают под микроскопом;

87. Для анализа почвы существует несколько методов:

а) метод Г.Н. Дорогина с применением центрифугирования водного смыва, пленочный метод Н.Н. Владимирской, методы А.Г. Николаева и К.Е. Шарикова. Три последних метода основаны на использовании жидкостей с большей плотностью, чем плотности зооспорангиев, таких, как растворы минеральных солей плотностью не менее 1,36-1,45, дихлорэтана, четыреххлористого углерода и другие, для извлечения зооспорангиев;

б) метод К.Е. Шарикова. Почву, предназначенную для анализа, доводят до воздушно-сухого состояния. От каждого почвенного образца берут среднюю пробу, для чего его измельчают и просеивают через сито с отверстиями 1 мм. Затем от просеянной почвы берут среднюю пробу и просеивают через сито с отверстиями 0.25 мм. Покоящиеся зооспорангии ни проходят через сито, а крупные частицы почвы задерживаются.

Просеянную почву помещают в центрифужную пробирку и наливают 3-4 мл четыреххлористого углерода (можно дихлорэтана). Пробирку тщательно взбалтывают в течение 1-2 минут, а затем медленно центрифугируют не более 1-2 минут со скоростью 500-600 оборотов в минуту, чтобы крупные частицы почвы ссели на дно пробирки. Зооспорангии оказываются на поверхности, или во взвешенном состоянии, с небольшим количеством органических примесей. Затем жидкость сливают на часовое стекло и помещают в вытяжной шкаф для испарения. После испарении на часовом стекле остается легкий осадок, который частями переносят на предметное стекло в каплю машинного масла или разбавленного водой глицерина и просматривают под микроскопом для обнаружения и oпределения покоящихся зооспорангиев.

88. Живые растения (саженцы, черенки, цветы):

а) саженцы и черенки всех культур просматривают через лупу на наличие тех или иных признаков заболевания (пятнистости, язвочки, наплывы, раковые образовании) и плодоношений грибов (пикниды, подушечки и другие). Экземпляры с такими признаками отбирают для определения возбудителя болезни микроскопированием;

б) если микроскопированием невозможно сразу выявить и определить возбудителя пораженных частей растений, проводят дополнительное исследование. Для получения спороношения гриба отобранный материал помещают во влажную камеру или на питательную среду;

в) из грибных болезней карантинного значения на живых растениях могут быть обнаружены: на хризантемах-аскохитоз, на саженцах древесных, плодовых, кустарниковых - техасская корневая гниль;

г) из болезней, не имеющих карантинного значения, но ограниченно распространенных на территории республики, могут встречаться на винограде черная пятнистость винограда и эутипное увядание, или эутипоз.

89. Вирусологический анализ:

а) среди вирусных микоплазменных болезней имеются особо опасные для многих сельскохозяйственных культур. Наиболее вредоносны эти болезни там, где ареалы чувствительных к возбудителю видов растений совпадают с фауной переносчиков, а климатические условия благоприятствуют росту и развитию тех и других. Массовому распространению и заражению способствует передача возбудителя семенным и посадочным материалом механически при обработке, черенковании и так далее;

б) пораженные растения чаще становятся хронически больными, проявляя четкие симптомы либо не проявляя их вообще;

в) отсутствие на семенах, луковицах и черенках видимых симптомов болезни, трудоемкость и длительность методов выявления возбудителей значительно осложняют карантинный досмотр импортного материала на вирусные и микоплазменные болезни. Поэтому целесообразно осуществлять обмен семенным, посадочным и прививочным материалом, свободным от возбудителей вирусных и микоплазменных заболеваний;

г) если проверку растительного материала на вирусную и микоплазменную природу заболеваний в стране-экспортере не проводили, карантинный контроль можно осуществить только в интродукционно-карантинных питомниках, применяя общепринятые вирусологические методы исследований, иногда параллельно несколько из них. Положительные результаты по переносу вируса зависят от биологических особенностей возбудителя, наличия смешанных инфекций и концентрации вируса;

д) при выборе методов выявления вирусных болезней растений необходимо учитывать особенности возбудителя. Большинство вирусов овощных и технических культур легко передается механически, с соком больного растения, а вирусы плодовых невозможно передать без добавления стабилизаторов ввиду наличия в них веществ, инактивирующих вирус;

е) вирусную природу болезни по внешним признакам можно установить только при ясно выраженных симптомах. Один и тот же вирус может поражать разные роды, виды и сорта растений, проявляя разнообразные симптомы.

90. Методы диагностики вирусных и микоплазменных заболеваний растений:

а) метод прививок на растения-индикаторы:

1) широко применяется при определении вирусов и микоплазм древесно-кустарниковых пород. На сеянцы растений-индикаторов, которые отличаются повышенной чувствительностью к возбудителю, прививают глазок (окулировка) либо зеленый черенок, либо черешок листа или кусочек ткани (щитком) исследуемого растения;

2) прививки глазком и щитком древесных пород проводят обычно во время вегетации, когда кора легко отстает от древесины, лучше весной или осенью. Зеленый черенок и черешок листа можно прививать в течение всей вегетации. Результаты зависят от сроков и способов прививок, а также от концентрации возбудителя в исследуемом образце;

б) метод механического переноса вируса на травянистые растения-индикаторы:

1) успешно применяется для вирусов, передающихся механически, т.е. контактным способом. Этот метод широко используют для определения вирусных болезней однолетних и многолетних травянистых растений, а также древесно-кустарниковых пород;

2) соком, полученным из листьев исследуемых растений, с помощью ватного тампона натирают листья здоровых, чувствительных к определенным вирусам травянистых растений-индикаторов, предварительно опудренных карборундом;

3) при получении инфекционного сока плодовых и древесно-кустарниковых культур для заражения необходимо использовать стабилизаторы - 2 % никотин-сульфат в 0,01 н. фосфатном буфере.

4) симптомы на растениях-индикаторах проявляются в виде местной реакции (некротические локальные пятна) или общего системного заражения (мозаичные и хлоротичные узлы) в зависимости от вида вируса и индикатора. Срок проявления симптомов при местной реакции сравнительно короткий - 3-4, иногда до 10-12 дней, а при системном заражении - 10-12 дней и до 2-3 недель;

в) метод электронной микроскопии:

1) с его помощью можно установить размеры, форму, структуру вирионов и микоплазменных организмов. Техника приготовления пленки на сетке и препаратов для просмотра в микроскопе зависит от особенностей исследуемого объекта;

2) для электронно-микроскопических анализов микоплазменных организмов предварительно готовят ультра-тонкие срезы, используя методы фиксации и окрашивания до нарезки на ультрамикроскопе. После нарезки срезов их просматривают в электронном микроскопе;

г) метод передачи насекомыми:

1) применяют при переносе вирусов и микоплазменных организмов. В распространении инфекции в природе участвуют тли, цикадки. клещи и многие другие насекомые, которые передают инфекцию механическим и биологическим способами. При механическом способе процесс инфицирования происходит очень быстро, но инфицированность скоро утрачивается. При биологическом способе организм насекомого является источником сохранения возбудителя в природе. Учитывая эти особенности, специально подобранных насекомых выращивают в стерильных условиях, затем помещают на больные растения с последующим переносом на здоровые индикаторные растения;

2) симптомы проявляются по-разному в зависимости от концентрации возбудителя и подготовленности насекомых;

д) метод включений:

1) основан на образовании в клетках пораженных растений кристаллических, паракристаллических или аморфных тел - включений, отсутствующих у здоровых растений. Включения могут обнаруживаться в клетках корней, стеблей, листьев, цветков и плодов зараженных растений. Чаще они встречаются в клетках эпидермиса и волосков листьев овощных, зерновых, зернобобовых и цветочных культур.

2) метод используют для установления вирусной природы болезней и их дифференциальной диагностики;

е) серологический метод:

1) основан на способности вирусом при введении в организм животных вызывать в крови образование антител. Сыворотки, полученные из крови иммунизированных животных, обладают способностью вступать в специфические реакции с вирусами. Метод можно применять для выявления скрытого вирусоносительства.

2) при обнаружении вирусных и микоплазменных болезней на импортном материале больные растения следует уничтожить, а в случае ценности исходного материала для селекционных работ оздоровить с помощью термотерапии и метода меристемной культуры ткани.

8. Экспертиза на карантинные сорные растения

91. Цель экспертизы - выявление засоренности материала семенами и плодами отсутствующих и ограниченно распространенных в республике карантинных сорных растений, а также обычных широко распространенных видов.

92. Оборудование:

а) при проведении экспертизы на сорные растения необходимо иметь следующее оборудование: бинокуляр, бинокулярную лупу налобную; лупу с ручкой или складную, настольные стекла или разборные доски, шпатели металлические или пластмассовые, совочки металлические, сита зерновые (набор с размером ячеек от 0,1 до 3 мм), щупы мешочные, цилиндрические и конусные, весы на 2 кг, сушильный шкаф, пинцеты, скальпели, препаровальные иглы, чашки Петри, предметные и покровные стекла, часовые стекла, колбы, пробирки, воронки, мерные цилиндры на 0,5 л, мензурки, банки с притертой пробкой, спиртовку, сетку металлическую, штатив металлический, бритву;

б) лабораторной экспертизе на выявление семян, плодов и вегетативных органов размножения карантинных сорных растений подвергаются:

1) средние образцы от партии семенного материала всех сельскохозяйственных, плодовых и цветочно-декоративных культур, а также лесных пород и диких растений;

2) средние образцы от партий семян и зерна, предназначенных для продовольственных, фуражных и технических целей;

3) мелкие партии и образцы семян (до 3 кг), поступающие для научно-исследовательских работ или как коллекционный материал;

4) посадочный материал;

5) гербарии и образцы почвы;

6) образцы шерсти, сена, соломы, растительной подстилки.

в) экспертизе на сорные растения подлежат материалы, поступающие из-за границы, а также отечественного происхождения.

93. Экспертиза средних образцов семян и зерна:

а) лабораторная экспертиза - один из этапов определения карантинного состояния досматриваемых растительных материалов, поэтому результаты ее в значительной мере обуславливаются правильно проведенными досмотром и отбором от партий исходных и средних образцов;

б) после энтомологической и фитопатологической экспертизы средние образцы семян продовольственного и фуражного зерна и технических культур поступают к специалисту по сорным растениям. Для облегчения просмотра образцы просеивают через сита, размер которых подбирают в зависимости от величины семян анализируемой культуры и характера засоренности. Удобнее всего образцы крупных и средних семян пропускать через два сита, а мелких - через одно;

в) сита подбирают таким образом, чтобы на первом оставались в основном семена анализируемой культуры, на втором - примеси среднего размера, в том числе семена амброзии, сорных видов подсолнечника, паслена, а на поддон просеивались самые мелкие примеси, в том числе семена повилик и стриг;

г) ориентировочный размер продолговатых отверстий сит: для крупных семян (конские бобы и другие) 3,5?1-8 мм, для хлебных злаков, бобовых и других семян 2,5 ? 1.8 мм для семян трав типа клевера красного диаметром 1,2 мм. Просеивание проводят вручную - продольно-возвратными движениями в направлении длины отверстия в решете в течение трех минут с общим количеством колебаний до 180. Для просеивания можно использовать решетчатый вибрационный классификатор типа РКС-1 или РКФ-1 (с ферромагнитным приводом);

д) после просева всего образца просматривают отдельно каждую фракцию, для чего высыпают ее небольшими порциями на настольное стекло или на стол, покрытый плексигласом. Семена разбирают с помощью шпателя и просматривают через лупу с 3-5-кратным увеличением;

е) обнаруженные семена и плоды сорных растений отбирают и складывают отдельно по видам в розетки или на часовые стекла, стоящие рядом. Самую мелкую фракцию, оставшуюся на поддоне, дополнительно просматривают под бинокуляром, особенно при экспертизе семян зерновых культур, поступающих из стран распространения стриг, и семян овощных культур, льна и трав на выявление повилик;

ж) все выделенные виды семян сорных растений группируют по семействам и определяют, пользуясь карпологической коллекцией, определителями семян, атласами и другой специальной литературой.Чтобы хорошо рассмотреть структуру поверхности семян и форму семенного используют бинокуляр с окуляром 10 X и объективом 4;

з) определение плодов и семян сорных растений требует навыка и тщательности, так как у многих карантинных сорняков они похожи на некарантинных, ошибка может привести к неправильному определению карантинного состояния анализируемой партии. Например, семена паслена клювовидного очень похожи на семена другого вида семейства пасленовых - дурмана обыкновенного (Datura stramonium L.), семена паслена каролинского очень близки к семенам культурного растения семейства паслёновых - физалиса (Physalis L.). Очень трудно отличить семена подсолнечника сорного от семян культурного, а также от семян лопушника (Arctium lappa L.) и нуга, или гизоции (Guisotia sp.) Семена повилик, особенно, если они взяты из партии семян трав обработанных магнитным порошком, очень трудно отличить от мелких семян маревых (Chenopodiaceae). Относительно легко определяются ложные плоды амброзий (Ambrosia sp. sp.), их отличают от других видов семейства сложноцветных по куполообразной вершине, заканчивающейся столбиком длиной до 1 мм, и разной степени выраженным шипикам вокруг вершины плода. Но отличить семянки амброзии полыннолистной от семянок амброзии многолетней или ложные плоды амброзии трехраздельной от ложных плодов амброзии приморской очень трудно;

и) поскольку при экспертизе на сорные растения необходимо выделять все семена и плоды сорных растений, естественно, надо уметь отличать их и от семян культурных растений. В этом отношении наибольшую трудность представляют колоски злостного злакового сорняка сорго алепского (Sorghum halepense (L.) Pers), сходные с колосками близкого к нему культурного вида - суданской травы (Sorghum sudanense (Piper) Stapf.).

к) во всех случаях, когда определение вида семян представляет затруднения, следует очень внимательно рассмотреть их под бинокуляром и сравнить форму, структуру поверхности, цвет, размеры с описанием, имеющимся в литературе. Но иногда и это не помогает. Тогда на помощь должны прийти сведения о происхождении растительного материала. Например, ложные плоды амброзии трехраздельной почти невозможно отличить от плодов амброзии приморской, но первый вид распространен на американском континенте и на севере Европы, а второй имеет очень ограниченный ареал - Средиземноморский бассейн. Если семена обнаружены в материале, поступившем из этого района (Италия, Испания, Египет, Марокко, Алжир, Тунис), то их следует отнести к амброзии приморской. Происхождение необходимо учитывать и при определении семян подсолнечника сорного в продукции отечественного происхождения;

л) после определения ботанического состава сорняков проводят количественный учет всех видов семян карантинных сорняков. Для этого все обнаруженные при анализе коробочки повилик и стриг, ягоды пасленовых, корзинки сложноцветных вскрывают и посчитывают морфологически оформившиеся семена. Двойные семена повилик считают за два отдельных семени, незрелые семена учитывают как вполне вызревшие.

м) встречающиеся беловато-зеленые семена повилики, так называемые кальцинированные, рассыпающиеся при надавливании пинцетом в известковую пыль, не учитывают, так как они нежизнеспособны. Однако наличие кальцинированных семян повилики, а также пустых коробочек и пленок семян других карантинных сорняков отмечают в протоколе карантинной экспертизы, так как это указывает на засоренность партии семян. В случае ненахождения нормальных семян сорняков для окончательного суждения о карантинном состоянии партии необходимо дополнительно отобрать и проанализировать другой средний образец.

н) количество семян карантинных сорняков, обнаруженных в средних образцах, в протоколе экспертизы указывают в пересчете на 1 кг. Например, вес среднего образца мятлика по стандарту 30 г, если в этом образце обнаружено одно семя повилики, то в экспертизе проставляют 33 штуки/кг, десятые доли до 0,5 отбрасывают, выше округляют до единицы.

Обнаруженные семена некарантинных видов сорняков заносятся в протокол экспертизы с указанием вида без учета их количества.

94. Экспертиза мелких образцов семян:

а) при экспертизе мелких образцов семян (весом до 3 кг), предназначенных для селекционных и других научно-исследовательских целей или для коллекции, ботанических садов, проводится полный (100%) отбор всех семян и плодов сорняков из каждого мешочка или пакета (если пакетов с однородными семенами не более 25);

б) при массовом поступление небольших образцов для продажи просматривают определенное количество мешочков или пакетов в соответствии с ГОСТом. Количественный учет карантинных сорняков в этом случае не проводят, а в журнале и протоколе экспертизы указывают только наименование карантинных и других сорных растений.

95. Экспертиза почвы на карантинные сорняки: Любая почва содержит семена, плоды и вегетативные органы сорных растений, поэтому обязательно подвергается экспертизе на карантинные сорные растения.

Выделение семян и плодов сорных растений может быть осуществлено следующими тремя методами:

а) метод ручного выделения семян:

1) образец почвы частями высыпают на настольное стекло и, пользуясь шпателем, пинцетом и лупой, выбирают из него все встречающиеся плоды и семена сорных растений. Этот метод очень прост, но он не гарантирует извлечение семена стриг.

2) пользоваться этим методом удобно для анализа небольших образцов почвы, когда заведомо известно, что в них нет семян стриг и повелик;

б) метод отмывки:

1) образец почвы промывают на сите с таким размером отверстий, при котором будут задержаны все семена и плоды сорных растений. Этот метод используют при экспертизе больших образцов почвы. Из всего образца, поступив в лабораторию, отбирают образец весом от 50 г до 0,5 кг (в зависимости от общего объема образца) и помещают его в одно или несколько сит высотой 15-20 см, диаметром около 10-12 см, с размером отверстии 0,25 мм, для семян стриг диаметр отверстий 0,1 мм (можно использовать шелковые сита, употребляемые для выдавливания нематод);

2) сита с образцами почв помещают в таз с водой так, чтобы они погрузились в воду на 1/2 - 2/3 высоты. В таком положении сита оставляют до тех пор, пока почва не размокнет. После этого, держа сито над раковиной, почву промывают струей воды, помешивая мягкой кисточкой. Как только из-под сита пойдет совершенно прозрачная вода, промывание прекращают. Струя воды должна идти в сито с минимальным напором, чтобы полностью избежать разбрызгивания и возможного выбрасывания семян из сита. Остаток с сита, состоящий из семян, органических и неорганических остатков, переносят на фильтровальную бумагу, просушивают и просеивают через сита с отверстиями 3,5 и 0,1 мм. Затем каждую фракцию просматривают через лупу, а мелкие примеси - под бинокуляром, все встречающиеся семена выбирают и определяют;

3) этот метод не совсем удобен для промывки суглинистых и супесчаных почв, после которых на сите остается большой остаток минеральных частей, а среди них очень трудно выделить мелкие семена повилик и стриг. В этом случае лучше пользоваться методом флотации или, как его еще называют, методом насыщенных (тяжелых) растворов.

в) метод насыщенных растворов:

1) основан на разности удельного веса минеральной и органической части почвы. В среднем удельный вес минеральной части 2,4, а органической, в том числе и семян, - 1,4.

2) в качестве тяжелого раствора используют смесь бромоформа (4 части) и серного эфира (4 части по объему). Эта смесь имеет удельный вес 1,7. Но можно использовать и такие средства как поташ и хлористый цинк. Насыщенный раствор поташа (530 г на 1 л воды) имеет удельный вес 1,57, хлористого цинка (700 г на 1 л воды) - 1,96. Для приготовления насыщенного раствора берут подогретую воду и в ней растворяют одно из этих химических веществ до тех пор, пока на дне сосуда не останется некоторое количество нерастворившейся соли. Раствору дают отстояться и проверяют его удельный вес с помощью ареометра;

3) для выделения семян навеску исследуемой почвы помещают в тяжелый раствор, осторожно взбалтывают и помешивают стеклянной палочкой. При этом минеральные частицы оседают на дно, а органическая часть и семена всплывают на поверхность или находятся во взвешенном состоянии;

4) все семена вместе с раствором сливают на фильтр и тщательно промывают чистой водой, затем обсушивают и анализируют, как при методе промывки почвы. Этот метод наиболее точен для выделения мелких семян повилик и стриг. Семена, удельный вес которых выше удельного веса указанных растворов, не могут быть выделены этим методом, семена горчака розового с удельным весом 3,1.;

5) для полной гарантии выделения всех семян методы комбинируют. В этом случае промывание, обсушивание и просеивание проводят, как при методе отмывки, а самую мелкую фракцию из сита с ячейками 0,1 мм, содержащую много мелких минеральных частей, для выделения семян помещают в тяжелый раствор, налитый в химический стакан емкостью 0,8-1,0 л.;

6) результаты экспертизы почвы заносят в протокол и журнал экспертизы, указывая все виды обнаруженных семян сорных растений.

96. Экспертиза других подкарантинных материалов:

а) образцы сена, поступающие в лабораторию на экспертизу, тщательно перебирают на настольном стекле. Все встречающиеся стебли с плодами и отдельные плоды (корзинки сложноцветных, ягоды пасленовых, коробочки повилик) выбирают. Затем все крупные части удаляют, а остающуюся на стекле труху просеивают через сита и анализируют по фракциям, как семена и зерно, после чего проводят определение плодов и семян. Образцы шерсти, волокна хлопчатника и других прядильных культур анализируют таким же способом;

б) посадочный материал просматривают на наличие корневищ, луковиц и корней многолетних сорняков и стеблей повилик. При обнаружении вегетативных органов или стеблей с плодами сорных растений, посадочный материал очищают. Если очистить его невозможно, пораженные растения изымают;

в) в гербариях просматривают каждый гербарный лист. Обнаруженные карантинные и другие отсутствующие в республике растения с плодами и семенами изымают или удаляют у них плоды и семена. Затем, чтобы они потеряли свою жизнеспособность, их выдерживают в термостате при температуре 100 - 110°С в течении 40 - 60 минут.

97. Некоторые ботанические определения и характеристики семян и плодов карантинных сорных растений:

а) в семенном материале и другой сельскохозяйственной продукции могут встречаться семена, плоды и ложные плоды, поэтому специалисту по сорным растениям необходимо знать, что собой представляют все эти органы размножения, а также некоторую ботаническую терминологию:

1) семя - орган размножения, образовавшийся от оплодотворенной семяпочки;

2) плод - орган размножения, образовавшийся после оплодотворения не только из семяпочки, но из всей завязи;

3) ложный плод - орган размножения, в образовании которого после оплодотворения приняла участие не только завязь, но и другие части цветка, например чашелистики у амброзии;

4) семенной рубчик - след прикрепления семени к семяножке. Форма и цвет его обычно являются характерными 'видовыми признаками;

5) основание семени - часть семени, заканчивающаяся рубчиком;

6) верхушка семени - противоположная часть семени.

б) плоды бывают односемянные (зерновки) и многосемянные (ягоды, коробочки), раскрывающиеся (бобы, стручки) и нераскрывающиеся (семянки);

в) при определении семян постоянными признаками являются очертание и форма плода, структура его поверхности, цвет и форма семенного рубчика. Размеры и цвет семян - признаки неустойчивые. Опушенность семян - признак устойчивый, но в сельскохозяйственной продукции волоски, шипы и другие выросты стираются.

98. Хранение и пересылка образцов карантинных сорняков:

а) все обнаруженные при экспертизе плоды, семена и гербарные образцы карантинных сорных растений сохраняют в лаборатории в течение трех месяцев, а затем используют для пополнения коллекций и гербариев. В последнем случае в этикетке проставляют название страны происхождения. Для коллекции используют также все образцы некарантинных сорняков.

б) для пересылки семена и плоды каждого вида отдельно под определенным номером помещают в пакетики. На пакетике пишут номер образца, наименование продукции, из которой выделен образец, страну происхождения, дату анализа и фамилию лица, проводившего анализ. Такую же этикетку вкладывают внутрь пакетика, после чего его плотно заклеивают. Гербарные образцы растений снабжают этикетками, помещают между двумя кусками плотного картона и завертывают в бумагу.