BAA

ОБ УТВЕРЖДЕНИИ ИНСТРУКЦИИ ПО ДОСМОТРУ КАРТОФЕЛЯ НА ВЫЯВЛЕНИЕ
ЦИСТООБРАЗУЮЩИХ НЕМАТОД И ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЮ ТРАНСПОРТНЫХ СРЕДСТВ
И ТАРЫ В ПРИДНЕСТРОВСКОЙ МОЛДАВСКОЙ РЕСПУБЛИКЕ

ПРИКАЗ

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ
ПРИДНЕСТРОВСКОЙ МОЛДАВСКОЙ РЕСПУБЛИКИ

9 апреля 2008 г.
N 221

(САЗ 09-40)

В соответствии с Законом Приднестровской Молдавской Республики от 11 марта 2004 года N 395-3-III "О фитосанитарном карантине" (САЗ 04-11), с изменениями и дополнениями, внесенными Законом Приднестровской Молдавской Республики от 29 ноября 2005 года N 676-ЗИД-III (САЗ 05-49), Законом Приднестровской Молдавской Республики от 12 марта 2004 года N 396-З-III "О защите растений" (САЗ 04-11), с изменениями и дополнениями, внесенными Законом Приднестровской Молдавской Республики от 23 декабря 2005 года N 712-ЗИД-III (САЗ 05-52), Указом Президента Приднестровской Молдавской Республики от 3 апреля 2007 года N 256 "Об утверждении Положения, структуры и штатной численности Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики" (САЗ 07-15), c изменениями, внесенными Указами Президента Приднестровской Молдавской Республики от 18 сентября 2007 года N 612 (САЗ 07-39), от 12 января 2008 года N 25 (САЗ 08-1), Приказом Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики от 10 ноября 2006 года N 481 "Об утверждении Положения о Государственной службе ветеринарного и фитосанитарного благополучия Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики" (рег. N 3785 от 19 января 2007 года) (САЗ 07-04), приказываю:

1. Утвердить Инструкцию по досмотру картофеля на выявление цистообразующих нематод и обеззараживанию транспортных средств и тары в Приднестровской Молдавской Республике (Приложение).

2. Направить настоящий Приказ в Министерство юстиции Приднестровской Молдавской Республики для опубликования в Собрании актов законодательства Приднестровской Молдавской Республики.

3. Контроль за исполнением настоящего Приказа возложить на начальника Государственной службы ветеринарного и фитосанитарного благополучия Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики Ткаченко В.Д.

4. Настоящий Приказ вступает в силу со дня официального опубликования.

  г. Тирасполь

9 апреля 2008 г.

    N 221

Приложение
к Приказу Министерства
здравоохранения и социальной защиты
Приднестровской Молдавской Республики
от 9 апреля 2008 года N 221

Инструкция по досмотру картофеля на
выявление цистообразующих нематод
и обеззараживанию транспортных средств и тары
в Приднестровской Молдавской Республике

1. Настоящая Инструкция разработана и распространяется на юридических лиц, физических лиц, в том числе индивидуальных предпринимателей, которые занимаются выращиванием, заготовкой, переработкой, перевозкой, хранением и реализацией подкарантинной растительной продукции и устанавливает порядок досмотра картофеля для выявления цистообразующих нематод.

2. В целях своевременного выявления карантинных объектов в импортном семенном и продовольственном картофеле государственными фитосанитарными инспекторами Государственной службы в ведении которой находятся вопросы карантина и защиты растений, проводится досмотр партий согласно "Инструкции по досмотру растительных подкарантинных материалов в ПМР" Приказ МЗ и СЗ ПМР N 726 от 13.12.2007 г. САЗ (08-3), и карантинной лабораторией проводится экспертиза отобранных от них образцов согласно "Инструкции по лабораторной экспертизе растительных подкарантинных материалов в ПМР" Приказ МЗ и СЗ ПМР от 13 декабря 2008 года, САЗ (08 - 9).

3. Зараженность картофеля нематодами рода Гетеродера устанавливают по наличию цист. Для их выявления проводят отбор проб клубней или сметок, содержащих почву, осыпавшуюся с клубней.

4. В складированных неподвижных партиях картофеля наибольшее количество цист концентрируется в верхних слоях. В перемешанных партиях, подверженных различным встряхиваниям, переборке и т. п., цисты осыпаются в нижние слои.

5. Наибольшая вероятность обнаружения цист рода Гетеродера и, в частности, картофельной нематоды в образцах сметок от партий картофеля до 50 тонн наблюдается при индексе досмотра 0,04-0,05, где индекс досмотра представляет собой частное от деления количества взятых проб для анализа на вес партии картофеля.

6. Одна проба сметок объемом в 200 мл принимается за 1. Частные меньше единицы также принимают за 1. Соответственно все частные больше 1 округляют до целых в сторону увеличения.

7. Расчет необходимого количества определяемых проб проводят по следующей формуле:

Х (кол-во проб) / вес партии = 0,05 (индекс досмотра)

Х = вес партии Х 0,05.

Например, от партии в 30 тонн при индексе досмотра 0,05 необходимо отобрать:

Х = 30 Х 0,05 0(0,5) = 2 пробы сметок.

От партий затаренного картофеля (свыше 100 и до 2000 мест) наибольшая вероятность обнаружения цист картофельной нематоды в образцах сметок наблюдается при индексе досмотра 0,003.

8. Расчет необходимого числа проб проводят по идентичной формуле:

Х (к-во проб) = число мест в партии Х 0,003 (индекс досмотра)

Например, от партии в 3000 мест отбирается девять проб сметок.

Величина пробы (выемки) - 1 - 2 клубня и 5 - 10 мл почвы, осыпавшейся с клубней. Из проб (выемок) составляется исходный образец. Величина исходного образца - не более 10 клубней и не более 100 мл почвы (сметок), отобранных в различных местах. Из исходных тщательно перемешанных образцов составляется средний образец. Величина среднего образца от партии - не более 3 - 5 кг (100 клубней) и не более 200 мл почвы (сметок). В случае, если объем сметок меньше минимального объема (20 мл), допускается отбор по 1 - 2 клубня в 10 различных местах бурта, вагона и т. д. Клубни собираются в ведро и очищаются от почвы путем неоднократных встряхиваний. В этом случае анализируется вся почва. Полученная почва прибавляется к первоначальному образцу сметок, а клубни возвращаются в партию.

9. От затаренной продукции отбор выемок допустим в виде отсыпки от выделенных мест для отбора проб. 10. От неоднородных перевозимых партий, а также хранящихся в буртах и закромах, пробы отбирают и анализируют отдельно от каждого бурта, закрома и перевозимой партии. От неоднородных по качеству партий, поступающих одновременно от нескольких поставщиков, без тары (навалом) и разными видами транспорта (автомашинами, вагонами, баржами, а также контейнерами и т. д.), пробы отбирают:

а) от каждой единицы транспорта при погрузке и разгрузке;

б) при транзите - 10% транспортных единиц.

11. От однородных по качеству партий, поступающих одновременно от одного поставщика, без тары (навалом) и разными видами транспорта (автомашинами, вагонами, баржами), отбирают пробы от 10% транспортных единиц. В однородных по качеству партиях допускается отбор от 10% буртов, закромов.

12. От саморазгружающихся автосамосвалов и транспортных тележек берут пробы в верхнем слое насыпи сразу после выгрузки.

13. От партий, поступающих и хранящихся без тары, отдельные выемки берут через равные промежутки по всей длине насыпи, бурта и т.д. в разных местах верхнего слоя.

14. Количество исходных образцов

определяется величиной партии:

От партии весом до 5 т 2 исходных образца

(автомашины, и т. д.)

От партии - весом до 20 т 3 исходных образца

(двухосный вагон)

От партии весом 21 - 60 т 4 исходных образца

(четырехосный вагон)

От партий весом 61 - 150 т 5 исходных образца (баржа)

От партии весом свыше 150 т от каждых 1 исходный образец

последующих 50 т берут дополнительно.

15. Анализ образцов:

а) анализ сметок проводят флотационным методом, при котором цисты вместе с органическими частицами всплывают в водной взвеси почвы;

б) флотационным методом анализируют образцы с помощью выделителей цист: лабораторного (ВЦЛ-1), переносного (ВЦП-1) или с помощью воронок (анализ сухих образцов), в зависимости от оснащенности лаборатории.

16. Способы выделения цистообразующих нематод:

а) при анализе с помощью аппаратов, выделителей цист в сосуд-смеситель почвы с водой вставляют воронку с крупноячеистым ситом (с диаметром отверстий 2 - 3 мм). На сито высыпают образец. Сметки при постоянном помешивании шпателем промывают струей воды из водного пистолета. В сосуде-смесителе водным потоком почва активно взмучивается и отстаивается 3 - 5 мин. (не более). Тяжелые минеральные частицы оседают, а легкие органические и цисты по сливному желобу смываются на два сита. Верхнее сито с диаметром ячей 2 - 3 мм задерживает крупные всплывшие частицы, нижнее сито с диаметром ячей 0,1 мм задерживает мелкие частицы и цисты. Образец промывают до появления чистой воды в сливном желобе.Осадок с нижнего сита просматривают на наличие цист, непосредственно под бинокуляром или же осадок сливают на фильтр, вложенный в воронку, и цисты ищут на фильтре. После каждого образца приемную воронку, сосуд-смеситель и сита тщательно промывают чистой водой и тем самым готовят аппарат к следующему анализу;

б) при анализе с помощью воронок образец предварительно просеивают через крупно-ячеистое сито (диаметр ячей 2 - 3 мм). Просеянную почву засыпают в сосуд (стакан), объем которого в 10 раз превышает объем анализируемой почвы. Почву заливают в сосуде водой и тщательно взмучивают содержимое шпателем или стеклянной палочкой. Почвы, богатые органическими веществами (например, торфянистые), перед получением водной взвеси смачивают денатуратом или спиртом из расчета 10 мл на 100 мл почвы. Полученную суспензию отстаивают 3 - 5 минут. После оседания крупных неорганических частиц почвы на дно стакана верхние 2/3 содержимого одним наклоном сливают на фильтры, предварительно вставленные в воронки диаметром 10 - 15 см. При сливе медленно поворачивают стакан вокруг своей оси, следя за полным сливом на фильтр всех всплывших на поверхность органических веществ. По окончании фильтрации ищут цисты нематод на фильтре под бинокуляром.. Основная масса цист располагается по наружному краю фильтра;

в) анализировать можно сухую и влажную почву. В последнем случае результаты получаются несколько хуже.

17. Анализ образцов клубней:

а) при анализе с помощью аппаратов - выделителей цист - пользуются большими приемными воронками емкостью 8 - 10 литров. Воронку снабжают крупноячеистым ситом, вставляют в треногу над сосудом-смесителем и заполняют клубнями. Промывают картофель струей воды. Весь последующий анализ проводят, как и анализ сметок;

б) при отсутствии указанных аппаратов клубни моют в ведрах. Смыв фильтруют, после чего цисты ищут на фильтрах. Найденные цисты помещают на часовые стекла в каплю чистой воды.

18. Определение цистообразующих нематод:

а) цисты просматривают под бинокуляром и определяют их группу по форме. У шаровидных и грушевидных цист овальная линия контуров тела прерывается выступающей шейкой. У лимоновидных цист, кроме шейки, имеется выступающий на противоположном заднем конце анально-вульварный конус;

б) бесконусные цисты принадлежат к группе картофельной нематоды, цисты с конусом относятся к группе шахтии (свекловичной нематоды);

в) определение вида нематод проводят по срезам анально-вульварных пластинок. Для этого цисту переносят в каплю, воды на предметное стекло и отсекают препаровальной иглой заднюю треть ее тела, т. е. часть, расположенную на противоположном от шейки конце. Отсеченную часть - анально-вульварную пластинку - осторожно освобождают иглой от яиц и личинок;

г) у бесконусных цист группы картофельной нематоды анально - вульварную пластинку помещают на предметное стекло в каплю чистого глицерина. Каплю покрывают покровным стеклом, окантовывая его края растопленным парафином, бальзамом или лаком;

д) отсеченный анально-вульварный конус цист группы шахтии помещают в разогретый раствор глицерин-желатина (9 г желатина заливают 40 мл дистиллированной воды и оставляют до разбухания. Затем добавляют 50 г глицерина и 1 г фенола. Смесь подогревают в водяной бане до получения однородной массы. Срез ориентируют наружной стороной кверху и покрывают покровным стеклом, края которого окантовывают, как и в предыдущем случае;

е) для пересылки или хранения цисты фиксируют в течение 30 мин 4 - 10% раствором формалина, а затем готовят препараты из целых цист. При отсутствии глицерин-желатина цисты пересылают или хранят в 4 - 10% растворе формалина.

19. Определительная таблица видов p. Heterodera, встречаемых при анализе образцов сметок и клубней картофеля. Ключ видов группы картофельной нематоды приведен по Е. С. Кирьяновой, Э. Л. Краль, 1973 г., систематическое положение картофельной нематоды - Heterodera (Globodera) rostochi-ensis (Wollenweber, 1923):

а) внешняя форма цист округлая, шаровидная, с округлым задним концом. Группа картофельной нематоды. Форма цист лимоновидная, с выступающим вульварным конусом. Группа шахтии 10;

б) анально-вульварная пластинка с двумя равными по величине отверстиями: вульварным окном и анусом.

20. Точечная нематода (Heterodera punctata Thorne): Анально-вульварная пластинка с округлым окном и точечным анусом. Индекс Гранека (отношение расстояния вульва - анус к диаметру Бульварного отверстия) у цист, в среднем равен 1,5 и меньше. Бороздки кутикулы в середине тела цисты простираются в продольном направлении от анально-вульварной пластинки до основания шейки. Личинки очень тонкие, отношение длины тела к максимальной его ширине (индекс а) равно 39. Длина стилета личинки 18 мк. Отверстие дорзальной железы пищевода расположено на расстоянии в 2/3 длины стилета позади его основания.

21. Перуанская цистообразующая нематода (лептонепия) (Heterodera leptonepia Cobb et Taylor):

а) Бороздки кутикулы в середине тела цисты простираются в поперечном направлении. Личинки не очень стройные (а = 18 - 25), стилет 20 мк и больше. Отверстие дорсальной железы пищевода расположено на расстоянии в 1/3 длины стилета позади его основания.

б) Кончик хвоста у личинок закругленный. Самки с желтой фазой развития. Паразит табака Nicotiana tabacum L. Может размножаться на томате, баклажане, перце, паслене, но не на картофеле.

22. Табачная нематода (Heterodera tatracum В. et J):

а) Кончик хвоста у личинок заостренный. Самки молочно-кремового цвета, матовые, превращаются в коричневые цисты без четко выраженной желтой фазы развития;

б) паразиты сложноцветных. Растение-хозяин - полынь красночерешковая Artemisia rubripes Nakai.

23. Гетеродера артемизия (Heterodera artemisia Eroshenko): Растениями-хозяевами являются: тысячелистник, ромашка, трехреберник, пиретрум, нивяник, пижма, пупавка, хризантема.

24. Тысячелистниковая нематода Heterodera millefolii Kirjanova et Krall:

а) рисунок кутикулы у цист между анусом и вульварным отверстием в виде четко выраженного лабиринта. Передняя часть дорсальной головки стилета у самок вогнута.

б) индекс Гранека в среднем равен 2,8 (1,5 - 4,2). Типичный хозяин - паслен Каролинский, на картофеле не размножается.

25.Гетеродера вирджиния (Heterodera Virginia Miller et Gray):

а) рисунок кутикулы между анусом и вульварным отверстием не выглядит четким лабиринтом. Передняя часть дорсальной головки стилета у самок не вогнута Рисунок кутикулы между анусом и вульварным отверстием в виде глубоких зигзагов, наподобие гравировки;

б) индекс Гранека в среднем равен 2,2 (1,3 - 3,8). Длина стилета у личинок равна 24 (22 - 26) мк. Отверстие дорсальной пищей одной железы расположено на расстоянии 5,5 (5 - 7) мк позади основания стилета;

в) типичный хозяин - паслен каролинский. На картофеле паразит не размножается.

26. Пасленовая нематода (Heteroderasolanacearum Miller et Gray):

а) рисунок кутикулы между анусом и отверстием вульвы неимеет глубоких зигзагов наподобие гравировки. Типичные паразиты картофеля;

б) индекс Гранека в среднем равен 4,6 (2,7 - 8,9). Между анусом и отверстием вульвы имеется в среднем 21 (16 - 31) складка кутикулы. Самки с золотисто-желтой фазой. Длина стилета самок равна 22,9 (21 - 25) мк. У личинок стилет длиной 22 (21 - 23) мк, отверстие дорсальной железы пищевода расположено на расстоянии в 5,5 (5,0 - 6,7) мк позади основания стилета; головки стилета направлены назад, спереди не заострены.

27. Картофельная нематода.(Heterodera rostochiensis Woll):

а) индекс Гранека равен 2,1 - 2,5, между анусом и вульвой 12 (8 - 20) складок кутикулы. Самки белые или кремовые. Цисты желтой фазы не имеют. Длина стилета у самок 26,7 (23 - 29) мк. у личинок стилет длиной 23,6 (21 - 26) мк, отверстие дорсальной пищеводной железы расположено на расстоянии в 2,8 (2 - 6) мк позади основания стилета; головки стилета спереди заострены.

28. Бледная нематода (Heterodera pallida Stone):

а) имеются сильно развитые, хорошо заметные буллы. Буллы отсутствуют или слабо развиты. Сильно развитые буллы расположены у поверхности вульварного окна, образуя коронку булл. Бульварная щель короткая, короче Бульварного моста. Полуокна широко расставлены. Рисунок полуокон в вульварной щели образует цифру 8.

29. Овсяная нематода (Heterodera avenae Woll):

а) буллы расположены значительно ниже. Бульварная щель равна длине Бульварного моста или длиннее его. Бульварная щель не длиннее Бульварного моста. Бульварная щель намного длиннее Бульварного моста- буллы большие, хорошо просматриваются Имеется пигментированный большой подмост.

30. Пикульниковая нематода (Heterodera galeopsidis Goffart):

а) Раздвоения подмоста нет. Циста симметричная.

31.Свекловичная нематода (Heterodera schachtii Schmidt):

а) имеется раздвоение подмоста. Циста симметричная.

32. Клеверная нематода (Heterodera trifoli! Goffart):

а) бульварный мост хорошо развит, довольно широкий. Бульварный мост очень тонкий, нежный. Цисты маленькие, вульварное окно с неясными контурами. Буллы иногда отсутствуют, а если имеются, то они маленькие и их немного. Подмост находят редко.

33. Морковная нематода (Heterodera trifoli Goffart):

а) субкристаллический слой хорошо заметен. Субкристаллического слоя не видно. Вульварное окно в длину вдвое больше ширины, полу окна широко расставлены. Длина вульварной щели равна длине моста, цисты маленькие (0,4 - 0,5 мм),

34. Хмелевая нематода(Heterodera humuli Filipjev ):

а) вульварное окно с неясными контурами. Длина и ширина примерно одинаковы. Полуокно почковидное. Длина вульварнойщели меньше длины моста. Цисты маленькие (0,4 - 0,5 мм), лимоновидные.

35. Капустная нематода (Heterodera cruciferae Franclin):

а) цисты маленькие (диаметр 0,5 мм), округлые, лимоновидные. Вульварное окно округлое. Булл и подмоста нет. Анус заметный.

36. Кактусовая нематода (Heterodera cacti Fil. et Sch. Stekhoven):

а) цисты большие (диаметр 0,7 - 1,0 мм), широкие, несколько лимоновидной формы. Цолуокна широкие и округлые. Вокруг полуокна на вульварной пластинке имеется ясный кубикообразный рисунок. Подмост обычно имеется, прилегает близко к вульве. Буллы отсутствуют.

37. Гороховая нематода (Heterodera agottingiana Liebcher)

38. Обеззараживание транспортных средств и тары от цист картофельной нематоды:

а) обеззараживание транспортных средств и тары от цист картофельной нематоды проводят на специальных дезинфекционно - промывочных площадках;

б) вагоны освобождают от растительных остатков и почвы. Для этого их выметают, а затем промывают горячей водой при температуре 60 - 70° С из шланга под давлением в 2 атмосферы;

в) вагоны обрабатывают горячим (60 - 0°С) 2 - 4% раствором едкого натрия (NaOH) или осветленным раствором хлорной извести с 2 - 3% активного хлора. Обработку растворами одного вагона проводят в течение 15 - 20 минут, включая наружную обработку вагонов. Дезрастворы подают из шланга под давлением 2 атмосферы. Норма расходов дезрастворов - 60 литров на один двухосный вагон (0,5 - 1 литр на 1 кв. м). При проведении обработок тщательно следят за обмыванием боковых стен, щелей, за соблюдением заданных режимов. Нельзя допускать снижения температуры раствора щелочи и уменьшения времени подачи растворов;

г) после обработки раствором (NaOH) вагоны через 30 минут вторично промываются горячей водой, а после обработки осветленным раствором хлорной извести вагоны выпускаются со станции только через 30 минут;

д) эффективность обработки осветленным раствором хлорной извести с 2 - 3% активного хлора в течение 15 минут подачи раствора в транспортное средство равна 84%, в течение 10 минут - 50 - 73%;

е) обеззараживание других видов транспортных средств и деревянной тары проводят по аналогии с обеззараживанием вагонов;

ж) мешки перед обеззараживанием вытряхивают, освобождают от почвы и растительных остатков. Обеззараживание проводят в камере Крупина (навешивают на крючки, рыхло укладывают на решетчатый пол). Обрабатывают мешки в течение 30 - 40 минут паром при температуре 110°С и давлении 0,5 - 0,7 атмосфер. Эффективность обеззараживания мешков от цист картофельной нематоды в камере Крупина с указанными режимами равна 100%;

з) сточные воды и почву обеззараживают на дезпромстанциях хлорной известью. Растительные остатки сжигают.

39. Определение жизнеспособности цист картофельной нематоды:

а) жизнеспособность цист картофельной нематоды определяется после проведенных обеззараживаний транспортных средств и тары, при установлении зараженности партий растительного материала или после проведенных мер борьбы на очагах;

б) определяют жизнеспособность по личинкам, выделенным из цист с помощью специального дробителя или при раздавливании последних в капле воды на предметном стекле;

в) под большим увеличением микроскопа (7 Х 20) просматривают состояние личинок:

1. живые личинки С-образной формы или имеют плавные изгибы тела. Внутри имеется слабая грануляция, хорошо просматривается железистый бульбус пищевода, при слабом подогреве личинки активны, заметны медленные колебательные движения тела, внутри живых личинок могут быть небольшие вакуоли (1 - 2);

2. мертвые личинки, как правило, имеют изломанную форму тела. Внутреннее содержимое просматривается бесформенной массой, содержащей большие вакуоли и во многих случаях крупные гранулы;

г) для определения жизнеспособности цист картофельной нематоды после проведенных мер борьбы на очагах дополнительно пользуются биотестами. В 200 мл простерилизованной супесчаной почвы помещают найденные живые цисты и клубень восприимчивого к нематодам сорта картофеля. Через 40 дней после появления всходов просматривают корни картофеля на наличие цист картофельной нематоды. Анализируют все 200 мл почвы;

д) в качестве контроля к биотестам служит растение картофеля, выращенное в равноценных условиях без заражения.

40. Юридические лица независимо от их организационно - правовой формы и формы собственности, физические лица, в том числе индивидуальные предприниматели за неисполнение настоящей Инструкции привлекаются к ответственности в соответствии с действующим законодательством Приднестровской Молдавской Республики.